Kit de ensayo de actividad de MMP fluorimétrico universal, *Fluorescencia verde*. Este kit está diseñado para verificar la actividad general de una enzima MMP. También se puede usar para detectar inhibidores de MMP cuando se usa una enzima MMP purificada.
Descripción
Las metaloproteinasas de matriz (MMP) constituyen una familia de endopeptidasas dependientes de zinc que funcionan dentro de la matriz extracelular. Estas enzimas son responsables de la descomposición de los tejidos conectivos y son importantes en la remodelación ósea, el ciclo menstrual y la reparación del tejido dañado. Mientras que la contribución exacta de las MMP a ciertos procesos patológicos es difícil de evaluar, las MMP parecen jugar un papel clave en el desarrollo de la artritis, así como en la invasión y metástasis del cáncer. Las MMP tienden a tener múltiples sustratos, y la mayoría de los miembros de la familia tienen la capacidad de degradar diferentes tipos de colágeno junto con elastina, gelatina y fibronectina.
Es bastante difícil encontrar un sustrato que sea selectivo para una única enzima MMP. Este kit está diseñado para verificar la actividad general de una enzima MMP. También se puede usar para detectar inhibidores de MMP cuando se usa una enzima MMP purificada. También ofrecemos MMP enzimáticas de alta actividad.
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-13510 | Amplite® Universal Fluorimetric MMP Activity Assay Kit *Green Fluorescence* | 100 pruebas |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO).
Plataforma
Lector de Microplacas de Flourescencia
| Excitación | 490 nm |
| Emisión | 525 nm |
| Cutoff | 515 nm |
| Placa recomendada | Negra sólida |
Componentes
| Componente A: MMP Green™ Substrate | 1 vial (60 µL) |
| Componente B: APMA, 4-Aminophenylmercuric Acetate | 1 vial (20 µL, 1 M) |
| Componente C: Buffer de ensayo | 1 botella (20 ml) |
Espectro
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Propiedades espectrales
| Excitación (nm) | 494 |
| Emisión (nm) | 515 |
PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO
- Solución de trabajo de sustrato MMP Green™:
Agregue 50 μl de sustrato MMP Green™ (componente A) en 5 ml de buffer de ensayo (componente C) para obtener un volumen total de 5,05 ml de solución de trabajo de sustrato MMP Green™. - Dilución de MMP:
Diluya las MMP a una concentración adecuada en el buffer de ensayo (componente C) si se usa MMP purificada. Nota: MMP debe activarse antes de su uso. Evite agitar la enzima en un vórtex vigorosamente. - Dilución de inhibidores y compuestos:
Haga diluciones de inhibidores de MMP conocidos y compuestos de prueba según lo desee si está evaluando inhibidores de MMP.
Imagen
Figura 1. Detección de actividad de MMP con el kit MMP fluorimétrico universal Amplite®. Las MMP activadas por APMA, 30 ng cada una, se mezclaron con sustrato MMP Green™. La señal de fluorescencia se controló una hora después de comenzar la reacción utilizando un lector de microplacas NOVOStar (BMG Labtech) con un juego de filtros de Ex/Em = 490/525 nm. La lectura de todos los pocillos se sustrajo de la lectura del control de sustrato, que contiene sustrato MMP Green™ pero no MMP. El sustrato MMP Green™ puede detectar la actividad de subnanogramos de todas las MMP (n=3).
Productos Relacionados
| Nombre | Excitation (nm) | Emission (nm) |
| Amplite® Universal Fluorimetric MMP Activity Assay Kit *Red Fluorescence* | 545 | 572 |
| MMP Red™ substrate |
| MMP-3 Green™ substrate |
| Amplite® MMP-3 Activity Assay Kit *Green Fluorescence* |
| MMP Green™ substrate |
| MMP-3 Green™ substrate solution |
Bibliografía
Ver todas las 26 bibliografias: Citation Explorer
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Application Notes (en Ingles)
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