Buccutite™ Poly-HRP Antibody Conjugation Kit está diseñado para la preparación rápida de anticuerpos poli-HRP conjugados. El kit proporciona el poli-HRP preactivado con nuestro enlazador patentado Buccutite™ FOL.
Descripción
Kit de conjugación de anticuerpos poli-HRP Buccutite™
Se considera que los conjugados de poli-HRP-anticuerpo tienen la mayor sensibilidad en los inmunoensayos en los que la muestra es limitada o una molécula objetivo está presente en un nivel extremadamente bajo.
Buccutite™ Poly-HRP Antibody Conjugation Kit está diseñado para la preparación rápida de anticuerpos poli-HRP conjugados. El kit proporciona el poli-HRP preactivado con nuestro enlazador patentado Buccutite™ FOL. Un anticuerpo dirigido se activa con Buccutite™ MTA (incluido en el kit) para generar un anticuerpo activado por MTA. La mezcla simple de anticuerpo activado por MTA con poli-HRP activado por FOL para dar el conjugado de anticuerpo marcado con poli-HRP deseado. La reacción se produce en condiciones extremadamente suaves sin necesidad de catalizador.
El conjugado de anticuerpos de poli-HRP preparado con el kit de conjugación de anticuerpos de poli-HRP de Buccutite™ es compatible con sustratos de HRP cromogénicos, fluorogénicos y quimioluminiscentes utilizados en ensayos ELISA, inmunohistoquímica (IHC) y transferencia Western. También se puede utilizar con TSA o nuestros sustratos HRP fluorescentes Styramide™ para la detección ultrasensible de objetivos biológicos poco abundantes.
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-5518 | Buccutite™ Poly-HRP Antibody Conjugation Kit | 1x50ug etiqueta |
| AAT-5519 | Buccutite™ Poly-HRP Antibody Conjugation Kit | 2x50ug etiquetas |
Importante, Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento: Refrigeración de 2-8°C, evitar exposición a la luz.
Componentes
| AAT-5518 | AAT-5519 | |
| Componente A: Buccutite™ FOL-Activated HRP | 1 vial (liofilizado) | 2 viales (liofilizado) |
| Componente B: Buccutite™ MTA | 1 vial (liofilizado) | 2 viales (liofilizado) |
| Componente C: Reaction buffer | 1 vial (200 µL) | 1 vial (400ul) |
Preparación de Soluciones de Trabajo
Solución de trabajo de anticuerpos
Para marcar 50 µg de anticuerpo (suponiendo que la concentración de anticuerpo objetivo sea de 1 mg/ml), mezcle 5 µL (5 % del volumen total de la reacción) de buffer de reacción (componente C) con 50 µL de la solución de anticuerpo objetivo.
Nota Si tiene una concentración diferente, ajuste el volumen del anticuerpo en consecuencia para que ~50 µg de anticuerpo/50 µL estén disponibles para su reacción de etiquetado.
Nota: El anticuerpo debe disolverse en solución salina con fosfato (PBS) 1X, pH 7,2-7,4. Si el anticuerpo se disuelve en buffer de glicina, debe dializarse frente a 1X PBS, pH 7,2-7,4, o usar un filtro 10KD (cat. 60502 de AAT Bioquest) para eliminar las aminas libres o las sales de amonio (como sulfato de amonio y acetato de amonio). ).
Nota: Los anticuerpos impuros o los anticuerpos estabilizados con albúmina de suero bovino (BSA) o gelatina no estarán bien etiquetados.
Nota: La eficacia de la reacción del anticuerpo – Buccutite™ MTA se reduce significativamente si la concentración del anticuerpo es inferior a 1 mg/ml. Para una eficiencia de etiquetado óptima, se recomienda el rango de concentración final de anticuerpos de 1-10 mg/mL.
Imagenes
Figura 1. Las curvas ELISA directas se generaron usando el conjugado poliHRP-cabra-anti-ratón IgG preparado con el kit de conjugación de anticuerpos Buccutite™ Poly-HRP (Cat No. 5518, Cat No. 5519). Se recubrió una placa de 96 pocillos con IgG de ratón diluida en serie tres veces y se analizaron 100 µL de conjugado GAM IgG-poliHRP (100 ng/ml) usando el método ELISA estándar. Se usó una solución de sustrato de TMB (Cat No. 11003) para detectar la IgG de ratón inmovilizada con 5 min de incubación y lectura a 450 nm.
Azul: Kit Buccutite™ 5518 o 5519
Rojo: GXM IgG PolyHRP (proveedor A)
Verde: GXM IgG-HRP (proveedor B)
Figura 2. Las curvas de ELISA se generaron utilizando el conjugado poliHRP-cabra-anti-ratón IgG preparado con el kit de conjugación de anticuerpos Buccutite™ Poly-HRP (n.° de catálogo 5518 o n.° de catálogo 5519). Se recubrió una placa de 96 pocillos con IgG de ratón diluida en serie tres veces y se analizaron 100 ul de conjugado GAM IgG-poliHRP (100 ng/ml) usando el método ELISA estándar. Se usó una solución de sustrato TMB (n.° de catálogo 11003) para detectar la IgG de ratón inmovilizada con 5 min de incubación y lectura a 450 nm.
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Referencias
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FAQ
Are there any alternatives to BrdU (Bromodeoxyuridine)?
Question Are there any alternatives to Cy5?
Are there any alternatives to indocyanine green (ICG)?
Can DAPI bind to RNA?
Can DAPI stain dead cells?
AssayWise
HRP Antibody Labeling Using Buccutite™ Crosslinking Technology
iFluor® 700 Dyes
Hydroxyl Radical Detection
Peroxidase Detection
Buccutite™ Conjugation Kits: Quick and Easy Antibody Labeling