Conjugado Phalloidin-iFluor® 488

Este conjugado de faloidina fluorescente verde (equivalente a la faloidina marcada con Alexa Fluor® 488) se une selectivamente a las actinas F con una fotoestabilidad mucho mayor que los conjugados de fluoresceína-faloidina.

Descripción

Este conjugado de faloidina fluorescente verde (equivalente a la faloidina marcada con Alexa Fluor® 488) se une selectivamente a las actinas F con una fotoestabilidad mucho mayor que los conjugados de fluoresceína-faloidina. Usados ​​en concentraciones nanomolares, los derivados de faloidina son sondas convenientes para marcar, identificar y cuantificar actinas F en secciones de tejido permeabilizadas y fijadas con formaldehído, cultivos celulares o experimentos sin células.

La faloidina se une a los filamentos de actina con mucha más fuerza que a los monómeros de actina, lo que conduce a una disminución de la constante de velocidad para la disociación de las subunidades de actina de los extremos de los filamentos, lo que esencialmente estabiliza los filamentos de actina mediante la prevención de la despolimerización de los filamentos. Además, se encuentra que la faloidina inhibe la actividad de hidrólisis de ATP de la actina F. La faloidina funciona de manera diferente en varias concentraciones en las células. Cuando se introduce en el citoplasma en bajas concentraciones, la faloidina recluta las formas menos polimerizadas de actina citoplásmica, así como la filamina, en “islas” estables de polímeros de actina agregados, pero no interfiere con las fibras de tensión, es decir, haces gruesos de microfilamentos.

La propiedad de la faloidina es una herramienta útil para investigar la distribución de F-actina en las células al marcar la faloidina con análogos fluorescentes y usarlos para teñir los filamentos de actina para microscopía óptica. Los derivados fluorescentes de la faloidina han resultado ser de gran utilidad para localizar filamentos de actina en células vivas o fijas, así como para visualizar filamentos de actina individuales in vitro. Los derivados de la faloidina fluorescente se han utilizado como una herramienta importante en el estudio de las redes de actina a alta resolución. AAT Bioquest ofrece una variedad de derivados de faloidina fluorescente con diferentes colores para aplicaciones de imágenes multicolores.

CatalogoProductoPresentación
AAT-23115Phalloidin-iFluor® 488 Conjugate300 pruebas

Importante, Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento a largo plazo: Congelar a  < -15 °C. Minimizar la exposición a la luz.

Propiedades físicas

Peso molecular-1100
DMSODMSO

Espectro

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Propiedades Espectrales

Factor de correción (260 nm)0.21
Factor de correción (280 nm)0.11
Coeficiente de extinción (cm -1 M -1)750001
Excitación (nm)491
Emisión (nm)516
Rendimiento cuántico0.91
1 Buffer acuoso (pH 7.2)

Imagenes

Fig. 1

Figura 1. Imágenes de fluorescencia de células HeLa teñidas con el conjugado Phalloidin-iFluor® 488 utilizando un microscopio de fluorescencia con un juego de filtros FITC (verde). Las células se fijaron en formaldehído al 4 %, se co-marcaron con colorante mitocondrial MitoLite™ Red FX600 (catálogo 2677, Rojo) y Nuclear Blue™ DCS1 (catálogo 17548, Azul).

Fig. 2

Figura 2. Célula de cáncer de mama MDA-MB-231 creció durante 24 h. Las células se tiñeron con Phalloidin-iFluor 488 Conjugate (ATT Bioquest) siguiendo las instrucciones del fabricante. Las imágenes fueron adquiridas con un objetivo 63x/1.4NA en un microscopio con focal de escaneo láser Zeiss por la Instalación avanzada de bioimagen (ABIF) en McGill. Se muestra la Proyección de máxima intensidad de 19 imágenes con un espaciado de 0,2 um en Z.

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NameExcitation (nm)Emission (nm)Extinction coefficient (cm -1 M -1)Quantum yieldCorrection Factor (260 nm)Correction Factor (280 nm)
Phalloidin-iFluor® 350 Conjugate3454502000010.9510.830.23
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Phalloidin-iFluor® 514 Conjugate5115277500010.8310.2650.116
Phalloidin-iFluor® 532 Conjugate5375609000010.6810.260.16
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Phalloidin-iFluor® 594 Conjugate58860418000010.5310.050.04
Phalloidin-iFluor® 633 Conjugate64065425000010.2910.0620.044
Phalloidin-iFluor® 647 Conjugate65667025000010.2510.030.03
Phalloidin-iFluor® 680 Conjugate68470122000010.2310.0970.094
1 Buffer acuoso (pH 7.2)

Bibliografía

Ver todas las 184 bibliográfias: Citation Explorer

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Referencias

Ver todas las 127 referencias: Citation Explorer

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Application Notes (en Ingles)

iFluor® Dye Selection Guide