Proteina GPBAR1 (TGR5)

Proteina GPBAR1

Proteina de Cube Biotech

Descripción

Las proteínas de membrana son la clase de proteínas más relevante desde el punto de vista farmacéutico. Al mismo tiempo, es muy difícil obtenerlos en forma pura y activa. Los expertos en proteínas de Cube Biotech han trabajado arduamente para producir GPCR humanos con la calidad suficiente que ahora podemos ofrecer a la comunidad cientifica.

Nuestra primera proteína de membrana activa pura disponible es GPBAR1/TGR5, un GPCR humano involucrado en la homeostasis de los ácidos biliares, el metabolismo de la glucosa y el mantenimiento del peso. La proteína está disponible lista para usar, lista para estudios de unión de ligandos, cristalización y otros experimentos bioquímicos/biofísicos.

CatalogoProductoPresentación
CU-28101Proteina GPBAR1 (TGR5)10 ug
CU-28103Proteina GPBAR1 (TGR5)50 ug

Caracteristicas

Alternative namesGPBAR-1,TGR5, GPCR19, M-BAR, BG37
UniProt / UniGeneQ8TDU6 / 155918
Protein classGPCR, class A (Rhodopsin-like receptors)
OrganismHuman (Homo sapiens)
Sequence, explainedFull-length, wildtype sequence N-terminal HA signal sequence, 10x His-tag with spacer, HRV 3C protease site spacer, Rho1D4 tag
Sequence, One-Letter CodeMKTIIA LSYIFCLVFA MTPNSTGEVP SPIPKGALGL
SLALASLIIT ANLLLALGIA WDRRLRSPPA GCFFLSLLLA
GLLTGLALPT LPGLWNQSRR GYWSCLLVYL APNFSFLSLL
ANLLLVHGER YMAVLRPLQP PGSIRLALLL TWAGPLLFAS
LPALGWNHWT PGANCSSQAI FPAPYLYLEV YGLLLPAVGA
AAFLSVRVLA TAHRQLQDIC RLERAVCRDE PSALARALTW
RQARAQAGAM LLFGLCWGPY VATLLLSVLA YEQRPPLGPG
TLLSLLSLGS ASAAAVPVAM GLGDQRYTAP WRAAAQRCLQ
GLWGRASRDS PGPSIAYHPS SQSSVDLDLN GGHHHHHHHH
HHLEVLFQGP GSSGTETSQV APA
Affinity tagsHis-tag and Rho1D4-tag (both C-terminal)
Expression HostSF9 (baculovirus)
Size (excluding additional elements)379 (330) amino acids 40,606 (35,248) Da
Buffer composition0 mM NaCl, 20 mM NaH2PO4 pH 7.4, 0.1% Foscholine-12, 0.01% cholesterolhemisuccinate (CHS)
Purity>98%, determined via SDS-PAGE
HomogeneitySize exclusion chromatography
ActivityLigand binding measured by SPR using Taurolithocholic Acid Sulfate Disodium Salt (CAS 64936-83-0) at 10°C. Using a 1:1 binding model, the dissociation constant (Kd) was determined to be 1.1x10e-8 M.
FunctionReceptor for bile acid. Bile acid-binding induces its internalization, activation of extracellular signal-regulated kinase and intracellular cAMP production. May be involved in the suppression of macrophage functions by bile acids, and in modulating inflammation.
Literature referencesKawamata, Yuji, et al. “AG protein-coupled receptor responsive to bile acids.” Journal of Biological Chemistry 278.11 (2003): 9435-9440.

Preparación


Expression system: Sf9 (Baculovirus)
Purification: PureCube Rho1D4 Agarose, Size exclusion chromatography
Buffer: 100 mM NaCl, 20 mM NaH2PO4 pH 7.4, 0.1% Foscholine-12, 0.01% cholesterolhemisuccinate CHS)
Form: Liquid

Control de Calidad
Pureza: (SDS-PAGE): >98%, ver Fig. 1
Homogeneidad: Tamaño exclusión a cromatografía
Actividad: Unión del ligando medida por resonancia de plasmón superficial (SPR=
usando sal disódica de sulfato de ácido taurolitocólico (CAS 64936-83-0)
Utilizando un modelo de unión 1:1, se determinó la constante de disociación (Kd) para
ser 1,1 x 10-8 M (Fig.2).

Aplicaciones
• SDS-PAGE
• Western Blot
• Protein Crystallization
• Biochemical and biophysical analyses

• Ligand binding assays (e.g. SPR)

Envio y Almacenamiento

Este producto se envia en hielo seco y se almacena a -80°C. Evitar los ciclos de congelación y descongelación.

Imagenes

Figure 1: SDS-PAGE of GPBAR1, purified via Rho1D4 affinity chromatography. L: Lysate: FT: flow-through, W: Wash, E1-E3: elution fractions with purified GPCR.
Figure 2: Surface plasmon resonance measurement of GPBAR-1 / Taurolithocholic acid sulfate salt interaction. Using a 1:1 binding model, the Kd was determined to be 1.1x10e-8 M.

Descargo de responsabilidad: Nuestros productos están destinados para investigacion en aplicaciones de biología molecular. Estos productos no están destinados al diagnóstico, prevención o tratamiento de una enfermedad.

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