Descripción
El cartucho compacto PureCube Cu-NTA es una columna de cromatografía IMAC preempaquetada con resina PureCube Cu-NTA. Puede elegir entre dos tamaños, volumen de lecho de 1 ml y volumen de lecho de 5 ml. Consulte la tabla de características proporcionada para asegurarse de que el cartucho/columna sea compatible con su hardware FPLC como ÄKTA TM.
Si este no es el caso, recomendamos comprar la única resina PureCube Cu-NTA suelta y empaquetar las columnas usted mismo. Se puede encontrar un tutorial dedicado en el sitio correspondiente.
Alternativamente, también ofrecemos nuestros productos PureCube Cu-NTA como perlas magnéticas, si prefiere este método IMAC.
Catalogo | Producto | Presentación |
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CU-31602-Cu | PureCube Compact Cartridge Cu-NTA | 1×1 ml |
CU-31604-Cu | PureCube Compact Cartridge Cu-NTA | 5×1 ml |
CU-31606-Cu | PureCube Compact Cartridge Cu-NTA | 1×5 ml |
CU-31608-Cu | PureCube Compact Cartridge Cu-NTA | 5×5 ml |
Hojas de Datos / Protocolos
- PureCube Cu-NTA compact cartridge Datasheet
- Washing & Regeneration Protocol
- His-tag Western Blot Protocol
Caracteristicas
Usage | Specific binding and purification of 6x His-tagged proteins Binding of Copper-binding proteins |
Specificity | Affinity to His-tagged proteins Affinity to copper-binding |
Binding capacity | >80 mg/mL |
Bead Ligand | Cu-NTA |
Bead size | 40 μm |
Chelator stability | Stable in buffer containing 10 mM DTT and 1 mM EDTA |
Filling quantity | Delivered as a 50 % suspension |
Required equipment & materials | FPLC hardware like e.g. AEKTA Binding Buffer Elution Buffer |
Columna | ||
---|---|---|
PureCube Compact Cartridge 1 mL | PureCube Compact Cartridge 5 mL | |
Bed Volume | 1 mL | 5 mL |
Max. Flow Rate | 6 mL/min | 6 mL/min |
Dimensions: diameter X length (mm) | 5 X 35 | 17 X 35 |
Body material | Polypropylene | Polypropylene |
Inlet | 10-32 UNF female thread | 10-32 UNF female thread |
Outlet | 10-32 UNF female thread | 10-32 UNF female thread |
Envio y Almacenamiento
PureCube Compact Cartridge Co-NTA: Envio a temperatura ambiente: Buffer de almacenamiento: 20% ethanol, pH 6.5. Temperatura de almacenamiento: 2-8 °C
Resultado de laboratorio
Diferentes iones metálicos confieren diferente afinidad y especificidad de unión.
La carga de diferentes iones metálicos en una resina da como resultado diferentes afinidades y especificidades para una proteína etiquetada con His. En general, el cobalto exhibe la mayor especificidad de unión de los iones metálicos IMAC comúnmente utilizados, lo que conduce a rendimientos relativamente bajos pero de alta pureza. El cobre, en el otro extremo del espectro, tiene una alta afinidad que conduce a altos rendimientos pero a una unión inespecífica. En la búsqueda de la resina óptima para purificar una proteína, se recomienda explorar diferentes ligandos quelantes (IDA o NTA) y diferentes iones metálicos.
Figura 1: Afinidad y especificidad de los iones metálicos comúnmente utilizados para IMAC. Cargar una resina IMAC con diferentes iones metálicos puede ajustar la afinidad y la especificidad para optimizar la pureza y el rendimiento de una proteína purificada.
VIDEOS
FAQ
– ¿Cuáles son las razones de la unión no específica?
R: Aunque Co-NTA es la forma más pura de purificación de etiquetas His, algunas proteínas no deseadas aún pueden unirse a las perlas. Pero el lavado con NaOH después de la elución de la proteína de interés elimina las proteínas unidas inespecíficas de la resina.
– Quiero usar una alta concentración de EDTA y DTT. ¿Es posible utilizar Cu-NTA de Cube Biotech?
R: No, no se recomienda porque los iones de níquel se reducen con DTT o se disuelven con EDTA. Si desea utilizar altas concentraciones de EDTA y DTT, debe utilizar nuestra resina Indigo.
– ¿Puedo reutilizar perlas o cartuchos PureCube 100 Ni-NTA o puedo regenerarlos?
R: Sí es posible reutilizar las perlas. Recomendamos usar su protocolo de lavado y regeneración al menos después de cada 5 usos de las perlas.
– ¿Se pueden cortar las perlas de Cu-NTA?
R: Sí pueden. Sin embargo, recomendamos utilizar nuestras perlas NTA o IDA precortadas, para empezar.
Descargo de responsabilidad:
Nuestros productos están destinados para investigación en aplicaciones de biología molecular. Estos productos no están destinados al diagnóstico, prevención o tratamiento de una enfermedad.
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