Nuestros mejores ensayos para medir la viabilidad celular y la función mitocondrial
Salud Celular
Un paso esencial en las primeras etapas de la investigación traslacional es medir la citotoxicidad. La cartera de productos de ION está diseñada para ayudarlo a capturar fácilmente parámetros importantes de la salud celular, ya sea que su instrumento preferido sea un lector de placas, un microscopio de fluorescencia o un citómetro de flujo, utilizando una colección de criterios que son métricas indicativas de viabilidad o muerte celular. Estos criterios incluyen la actividad de esterasa intracelular como marcador de viabilidad celular, la integridad de la membrana plasmática como marcador de muerte celular y el potencial de la membrana mitocondrial como marcador de etapa temprana de apoptosis. Cuando se usan en combinación, estos ensayos pueden proporcionar una instantánea informativa de la salud celular.
Actividad de esterasa intracelular
La actividad de las enzimas intracelulares y la retención del colorante son características de las células viables. Durante la muerte celular, el aumento de la permeabilidad de la membrana plasmática provoca la fuga de enzimas y una reducción de la actividad. Los tintes que miden la actividad de la esterasa se modifican con restos de éster, lo que los ayuda a difundirse pasivamente a través de las membranas celulares y hace que los tintes no sean fluorescentes. Una vez dentro de la célula, las esterasas ubicuas presentes en el citosol escinden los restos de éster, activando la fluorescencia del tinte y atrapando el tinte dentro de la célula. Ofrecemos Calcein AM en múltiples formatos (seco o en una solución preparada) y en combinación con Ethidium Homodimer I como parte de ION Vital – Viability para que pueda detectar simultáneamente las células muertas.
Calcein AM
BCECF AM
(Ex/Em 495 nm/515 nm): La calceína AM es una forma de calceína no fluorescente que atraviesa la membrana y que se convierte en calceína fluorescente verde en células viables, lo que da como resultado una fluorescencia citosólica uniforme. La calceína se retiene bien en el citosol de la mayoría de las células sanas con membranas celulares intactas.
ION VITAL – Kit de Viabilidad
Este kit combina Ethidium Homodimer I y Calcein AM para proporcionar un ensayo basado en fluorescencia de dos colores para discriminar entre células vivas y muertas.
(Ex/Em 490 nm/535 nm) – BCECF AM es el indicador de pH intracelular verde fluorescente más popular, sin embargo, también se puede utilizar como marcador de actividad de esterasa intracelular. Para esta aplicación, BCECF se debe utilizar en modo no radiométrico utilizando ajustes de emisión y excitación FITC estándar.
Integridad de la membrana plasmática
Una pérdida de integridad de la membrana plasmática es un indicador de muerte celular. Los colorantes impermeables a las células que se unen a los ácidos nucleicos, como el homodímero de etidio I (EthD-I), se pueden utilizar para marcar los núcleos de las células con membranas plasmáticas comprometidas. Estos tintes se excluyen de las células sanas intactas y muestran una fluorescencia mínima en ausencia de ácidos nucleicos. Una vez que el tinte cruza la membrana celular y se une a los ácidos nucleicos (ADN) dentro de la célula, muestra un aumento significativo en la fluorescencia. ION vende EthD-I en múltiples formatos (seco o en una solución preparada) y en combinación con Calcein AM como parte de ION Vital – Viabilidad para que pueda detectar simultáneamente células viables.
Ethidium Homodimer I
(Ex/Em: 528 nm/617 nm) – EthD-I es una tinción de ácido nucleico impermeable a la membrana y de alta afinidad que marca selectivamente las células muertas con membranas plasmáticas comprometidas.
ION VITAL – Kit de viabilidad
Este kit combina Ethidium Homodimer I y Calcein AM para proporcionar un ensayo basado en fluorescencia de dos colores para discriminar entre células vivas y muertas.
Potencial de membrana mitocondrial
El potencial de membrana mitocondrial es una de las fuerzas impulsoras detrás de la síntesis de ATP mitocondrial y es necesario para mantener la homeostasis celular. Durante las primeras etapas de la apoptosis, la función mitocondrial y la integridad de la membrana se ven interrumpidas por la activación de proteínas apoptóticas y la posterior liberación de citocromo C, reservas mitocondriales de Ca2+ y otros componentes. Los colorantes sensibles al potencial de membrana, como JC-1 y JC-10, se pueden utilizar para controlar la pérdida de polarización de la membrana mitocondrial observada durante la apoptosis. Estos tintes se compartimentan en las mitocondrias sanas, lo que conduce a la formación de agregados que exhiben una fluorescencia naranja. Cuando se pierde el potencial de la membrana mitocondrial durante la apoptosis, estos tintes ya no se acumulan y vuelven a ser monómeros fluorescentes verdes. ION vende JC-10 individualmente y como parte de nuestra línea optimizada de productos ION Vital Assay
JC-10
(Ex/Em: 490,540 nm/525, 590nm) – JC-10 es una sonda de potencial de membrana mitocondrial. Posee una solubilidad acuosa superior en comparación con su análogo más conocido, JC-1. A bajas concentraciones, JC-10 es monomérico y emite una fluorescencia verde. JC-10 se acumula en las mitocondrias sanas, formando agregados J que exhiben una fluorescencia naranja. Su comportamiento potenciométrico permite el análisis radiométrico del potencial de la membrana mitocondrial, donde un cambio de fluorescencia naranja a verde es indicativo de mitocondrias comprometidas.
ION VITAL – Kit de Viabilidad
MitoVolt es un kit de ensayo de potencial de membrana mitocondrial que utiliza JC-10, un tinte potenciométrico que es más soluble que JC-1. Es una solución ideal para detectar cambios en el potencial de la membrana mitocondrial debido a la apoptosis celular u otros fenómenos que inducen estrés, y es compatible con microscopía de fluorescencia, citometría de flujo y aplicaciones de lectura de placas.
Explora nuestra línea de productos para la Salud Celular
Imagen | Producto | Descripción |
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La calceína AM es un indicador no fluorescente que atraviesa la membrana y que se convierte en calceína verde fluorescente mediante la actividad de la esterasa en células viables.
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![Ethidium homodimer product packaging, purple background](https://ionbiosciences.com/wp-content/uploads/ethidium-homodimer-i-packaging.png" "ethidium-homodimer-I-packaging") |
Rojo fluorescente, tinción de células muertas
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Ensayo de dos colores basado en fluorescencia para diferenciar entre células vivas y muertas |
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JC-10 permite el análisis radiométrico del potencial de la membrana mitocondrial, donde un cambio de naranja (Ex/Em: 540nm/590nm) a fluorescencia verde (Ex/Em: 490nm/525nm) es indicativo de mitocondrias comprometidas 5 x 50 μL |
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Kit de ensayo de potencial de membrana mitocondrial que utiliza JC-10, un tinte que se acumula en las mitocondrias polarizadas donde emite una fluorescencia desplazada hacia el rojo, que es más soluble que JC-1.
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