Nanodisc Assembly Kit MSP1D1 dH5-His POPC de Cube Biotech
Descripción
Las proteínas del andamiaje de membrana derivan de la apolipoproteína (apo; A-I). Se utilizan en las ciencias de las proteínas de membrana para estabilizar las proteínas de membrana en un entorno lipídico después de la eliminación de la membrana celular. El tamaño del nanodisco está determinado por el MSP que se utilizó para crear el disco. MSP1D1 dh5 (marcado con His) crea nanodiscos de ~7-8 nm de diámetro.
Este producto es un kit de ensamblaje de nanodiscos MSP. Contiene un vial de proteína de estructura de membrana liofilizada MSP1D1 dh5 (marcada con His) y un vial de fosfolípido de DMPC o POPC para ensamblar un nanodisco de MSP.
Con este kit de montaje, tanto las proteínas expresadas en células como las libres de células se pueden estabilizar en nanodiscos de MSP. Simplemente use el protocolo correspondiente para cada propósito (ver más abajo). La proteína MSP contiene una etiqueta His, tenga esto en cuenta al elegir la etiqueta de afinidad para su proteína de membrana.
Figure 1: Schematic of a MSP nanodisc. A Membrane-scaffold-protein (MSP, green) forms a disc-shaped structure with some phospholipids.
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| CU-26223 | Nanodisc Assembly Kit MSP1D1 dH5-His POPC | Kit |
Caracteristicas
| MSP PROTEIN | |
|---|---|
| Purity | > 90% (Determined by SDS-PAGE) |
| Number of amino acids | 184 |
| Molecular Mass | 21,468 Da |
| Extinction coefficient (in water) ε280 | 19,940 M-1cm-1 |
| Buffer | 20 mM TRIS pH 7.4; 100 mM NaCl; 0.5 mM EDTA |
| Origin | Human |
| Sequence (1-Letter Code), for more details, see datasheet | MGSSHHHHHH ENLYFQ GSTFSKLREQ LGPVTQEFWD NLEKETEGLR QEMSKDLEEV AKVQPYLDDF QKKWQEEMEL RQKVEPLGEE MRDRARAHVD ALRTHLAPYS DELRQRLAAR LEALKENGGA RLAEYHAKAT EHLSTLSEKA KPALEDLRQG LLPVLESFKV SFLSALEEYT KKLNTQ |
| Affinity tag | N-Terminal His-tag |
| Shipping Temperature | Room Temperature |
| Storage of lyophilized protein | -20°C for several months |
| Storage of reconstituted protein | 2-8°C for several days |
| Referencias | 1. Bayburt, T.H. et al. Reconstitution and imaging of a membrane protein in a nanometer-size phospholipid bilayer. J. Struct. Biol. (1998), 123(1):37-44 2. Civjan, N.R. et al. Direct solubilization of heterologously expressed membrane proteins by incorporation into nanoscale lipid bilayers. BioTechniques (2003) 35:556-563 3. Hagn, F. et al. Optimized phospholipid bilayer nanodiscs facilitate high-resolution structure determination of membrane proteins. J.Am.Chem. Soc. (2013), 135:1919-1925 4. Proverbio D., et al. Functional properties of cell-free expressed human endothelin A and endothelin B receptors in artifical membrane environments. Biochim.Biophys. Acta (2013), 1828(9):2182-92 5. Roos, C., et al. 2014, High-level Cell-free production of membrane proteins with Nanodiscs. In: Alexandrov, K., and Johnston W.A. (eds) Cell-free protein synthesis: Methods and Protocols. Methods in Molecular Biology, vol. 1118, Springer Science+Business Media. |
Envio y Almacenamiento
Este producto se envia a temperatura ambiente. Almacenamiento de copolímero disuelto: a 2-8°C. . Almacenamiento de copolímero liofilizado a tiempo largo: a -20°C.
VIDEO
Vea nuestro video tutorial sobre la creación de nanodiscos MSP. Explica todo el proceso, comenzando por la solubilización inicial con detergentes. La proteína que se estabilizó en esta demostración fue la bacteriorrodopsina.
También recomendamos nuestro video guía sobre nanodiscos en general.
FAQ
– ¿Es este el producto MSP correcto para mi proteína de membrana?
R: Esto no se puede responder fácilmente ya que cada proteína de membrana se comporta de manera diferente con cada tamaño de nanodisco y fosfolípido. Suele requerir un proceso de selección previo. Recuerde que las proteínas de membrana con menos dominios transmembrana (TMD) requieren un nanodisco más pequeño, mientras que una gran cantidad de TMD necesitan un nanodisco más grande.
– ¿Puedo acortar el protocolo de estabilización Cell-Free?
R: En cierto sentido. Tambien puede utilizar nuestros nanodiscos MSP ya preensamblados para omitir el ensamblaje del nanodisco, que requiere mucho tiempo.
– Los nanodiscos de MSP requieren solubilización con detergentes antes. ¿También ofrecen estos?
R: Si ofrecemos detergentes. Los productos los encontrará Aqui.
– Nunca antes había trabajado con nanodiscos MSP. ¿Puedes informarme más sobre ellos?
R: ¡Por supuesto! De hecho, creamos esta GUÍA DE NANODISCO MSP con este fin. Favor de visitar.
– ¿Existen otras opciones para estabilizar las proteínas de membrana además de los nanodiscos MSP?
R: Sí hay otra opción. Recomendamos los nanodiscos de copolímero sintético. Favor de visitar esta siguiente pagina GUÍA para obtener más información.
Descargo de responsabilidad:
Nuestros productos no están destinados al diagnóstico, prevención o tratamiento de una enfermedad. Los nanodiscos están protegidos por las patentes estadounidenses 7.691.414; 7.662.410; 7.622.437; 7.592.008; 7.575.763; 7.083.958; 7,048,949
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