Indicadores de Talio
INDICADORES DE TALIO
El talio se puede utilizar como ion sustituto para medir la actividad de los canales y transportadores de potasio y sodio.
Ensayos e Indicadores de Talio
• El sodio (Na⁺) y el potasio (K⁺) son los dos cationes metálicos monovalentes fisiológicamente más importantes. Los transportadores y canales iónicos de Na⁺ y K⁺ se encuentran en cada célula de cada organismo conocido y son fundamentales para la vida. Si bien los medicamentos dirigidos a estos canales y transportadores se utilizan para tratar indicaciones que van desde la diabetes tipo II hasta la epilepsia y la presión arterial, el potencial terapéutico de este conjunto increíblemente diverso de proteínas sigue siendo en gran medida desconocido. Por lo tanto, los ensayos de canales iónicos son esenciales para promover el rápido descubrimiento y evaluación de canales y transportadores de cationes monovalentes como posibles objetivos terapéuticos.
• Si bien los indicadores fluorescentes sensibles al sodio y al potasio de ION, líderes en su clase, son excelentes herramientas para estudiar la dinámica celular del Na⁺ y K⁺, los cambios relativamente pequeños en las concentraciones intracelulares de Na⁺ y K⁺ en condiciones fisiológicas normales pueden hacer que Na⁺ y K⁺ Indicadores difíciles de usar, particularmente para aplicaciones de detección de alto rendimiento (HTS). En muchos casos, el ensayo de flujo de talio ofrece una excelente alternativa a los indicadores fluorescentes de potasio y sodio.
El ensayo de flujo de talio aprovecha un indicador fluorescente selectivo de Tl⁺, Thallos, y el hecho de que los canales y transportadores de potasio, así como los canales y transportadores de sodio, aceptan fácilmente Tl⁺ como catión sustituto. Cuando se agrega Tl⁺ al exterior de las células cargadas con Thallos, la Tl⁺ que ingresa a las células a través de canales iónicos y transportadores permeables a Na⁺ o K⁺ produce un aumento dramático de la fluorescencia. Aunque el ensayo de flujo Tl+ es el más comúnmente asociado con HTS de canales de potasio, es igualmente adecuado para HTS de canales de sodio y transportadores de sodio, así como para canales catiónicos monovalentes no selectivos.
Formatos y caracteristicas del indicador de talio.
• Thallos es un pequeño fluorocromo sintético que incorpora un resto de unión a Tl⁺ con excelente selectividad por Tl⁺ sobre la mayoría de los otros cationes metálicos fisiológicamente relevantes (por ejemplo, Ca²⁺). En condiciones en las que Tl⁺ no está unido, la fluorescencia del sensor se apaga significativamente. Cuando se une Tl⁺, se alivia la extinción y la fluorescencia del sensor aumenta drásticamente.
(EX 490 nm, EM 515 nm) El mejor indicador fluorescente sensible a Tl⁺ de su clase. Cuenta con una carga celular excepcional y una excelente compatibilidad con una amplia variedad de detectores, incluidos microscopios fluorescentes, lectores de placas y citómetros de flujo que utilizan filtros FITC comúnmente disponibles. Ver Producto
(EX 525 nm, EM 550 nm) Un indicador fluorescente sensible a Tl⁺ desplazado al rojo que es menos sensible a ambientes de pH ácidos que Thallos. Cuenta con una carga celular excepcional y una excelente compatibilidad con una amplia variedad de detectores, incluidos microscopios fluorescentes, lectores de placas y citómetros de flujo que utilizan filtros YFP comúnmente disponibles. Además de los tintes individuales, también ofrecemos la mayor selección de kits de ensayo Brilliant Thallium con reactivos empaquetados individualmente para brindarle la máxima flexibilidad para optimizar sus ensayos de canales iónicos. Nuestro ensayo Brilliant Thallium Snapshot, compatible con terminales, está diseñado para hacer que los ensayos de flujo de talio sean más accesibles, lo que le permite ejecutar pantallas de canales de iones funcionales sin automatización y en instrumentos con capacidad de fluorescencia fácilmente disponibles. Obtenga más información sobre nuestros kits de ensayo de talio para canales de sodio y potasio aquí. Ver Producto
Ensayos de canales de potasio y sodio utilizando flujo de talio.
Aunque la forma AM de los indicadores de talio cruza fácilmente la membrana plasmática, existen otros factores que pueden afectar la carga de estos tintes en las células. Debido a que los indicadores sensibles a Tl+ son bastante hidrófobos, es común utilizar el tensioactivo no iónico Pluronic F-127 para mejorar su solubilidad en solución acuosa, mejorando así su carga en las células. Pluronic F-127 en las concentraciones empleadas para cargar indicadores en las células generalmente se tolera bien. Si bien Pluronic F-127 no es absolutamente esencial para cargar estos tintes en las células, es muy recomendable.
Otro factor que puede afectar la carga celular y la localización intracelular es la presencia de proteínas de transporte capaces de transportar muchos indicadores fluorescentes sensibles a iones. En muchos tipos de células, la actividad de estos transportadores puede dar como resultado la compartimentación de los indicadores en compartimentos intracelulares, así como la extrusión de los indicadores fuera de la célula. Ambos procesos pueden reducir drásticamente los niveles de señal a fondo y, en algunos tipos de células (por ejemplo, células CHO), hacen que la carga adecuada de indicadores fluorescentes selectivos de Tl⁺ sea casi imposible. Afortunadamente, los inhibidores de estas proteínas de transporte pueden ser un medio eficaz para mejorar la localización citoplasmática y la retención del indicador. ION ofrece una cómoda solución inhibidora de ION-Pro 100X que se puede utilizar junto con cualquiera de nuestros indicadores fluorescentes sensibles a Tl⁺.
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| Imagen | Productos | Excitación | Emisión | |
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Thallos AM
El mejor de su clase, fluorescente verde, indicador de talio (Tl⁺), permeable a la membrana. Funciona con canales y transportadores de potasio (K⁺), sodio (Na⁺) y cationes monovalentes.
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Thallos Gold AM
Thallos Gold es un indicador de talio intracelular (Tl+) fluorescente de oro (Ex/Em = 528/552 nm). La excitación y emisión desplazadas al rojo permiten la multiplexación con células que expresan GFP u otros indicadores fluorescentes verdes. Útil para ensayos de canales de potasio basados en fluorescencia y para estudiar una amplia variedad de canales catiónicos monovalentes (canales de sodio), transportadores y GPCR.
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