Calcein AM

El derivado de acetometoxi (AM) de la calceína (Calcein AM) se usa ampliamente para marcar células vivas, ya que puede transportarse a través de la membrana celular hacia las células vivas.

Descripción

Calcein AM pasa fácilmente a través de la membrana celular de las células viables debido a su mayor hidrofobicidad en comparación con la Calceína. El derivado de acetometoxi (AM) de la calceína (calceína AM) se usa ampliamente para marcar células vivas, ya que puede transportarse a través de la membrana celular hacia las células vivas.

Los grupos éster AM enmascaran la parte de la molécula que quela el calcio. Al transportarse a las células vivas, las esterasas celulares cortan los grupos AM, la molécula se une al calcio dentro de la célula (lo que resulta en la adquisición de una fuerte fluorescencia verde) y queda atrapada en el interior. Como las células muertas carecen de esterasas, solo se marcan las células vivas. Esta característica lo hace muy útil para probar la viabilidad celular y para el marcado de células a corto plazo.

En comparación con otros reactivos de marcado de células vivas (como BCECF-AM y diacetato de carboxifluoresceína), la calceína-AM es la sonda fluorescente más adecuada para teñir células viables debido a su baja citotoxicidad. La calceína no afecta significativamente las funciones celulares como la proliferación o la quimiotaxis de los linfocitos. Además, los ensayos de viabilidad que utilizan calceína son fiables y se correlacionan bien con el ensayo estándar de liberación de 51Cr.

CatalogoProductoPresentación
22002Calcein, AM *CAS 148504-34-1*1 mg

Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento: Congelar (< -15 °C); Minimizar la exposición a la luz

Plataforma

Citómetro de Flujo

Excitación de laser488 nm
Filtro de emisión530/30 nm
Especificaciones instrumentoFITC channel

Microscopio de Fluorescencia

ExcitaciónFITC
EmisiónFITC
Placa recomendadaPared negra, fondo claro

Lector de microplacas de fluorescencia

Excitación490 nm
Emisión525 nm
Corte515 nm
Placa RecomendadaPared negra, fondo claro
Especificaciones instrumentoModo de lectura inferior

Propiedades fisicas

Peso Molecular994.86
DisolventeDMSO



Espectro

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Propiedades espectrales

Coeficiente de extinción (cm -1 M -1)81000
Exitación (nm)501
Emisión (nm)521

Calculadora

Preparación de la solución de stock común

Volumen de DMSO necesario para reconstituir la masa específica de calceína, AM CAS 148504-34-1 a la concentración dada. Tenga en cuenta que el volumen es solo para preparar la solución madre. Consulte el protocolo experimental de muestra para conocer los buffers experimentales/fisiológicos apropiados.

0.1 mg0.5 mg1 mg5 mg10 mg
1 mM100.517 µL502.583 µL1.005 mL5.026 mL10.052 mL
5 mM20.103 µL100.517 µL201.033 µL1.005 mL2.01 mL
10 mM10.052 µL50.258 µL100.517 µL502.583 µL1.005 mL

Imagenes

Fig. 1

Figura 1. Imágenes simultáneas de células HeLa vivas y apoptóticas marcadas con calceína AM (cat. 22002) y conjugado de anexina V-iFluor® 647 (cat. 20074).

Fig. 2

Figura 2. Imágenes de células vivas HeLa teñidas con Calcein, AM (Cat.22002).

Fig. 3

Figura 3. Imágenes de células vivas HeLa teñidas con Calcein, AM (Cat.22002). Los núcleos celulares se tiñeron con Hoechst 33342 (Blue, Cat#17535).

Fig. 4

Figura 4. Esquema de modulación de temperatura experimental. Las células se mantuvieron inicialmente a 37 °C. (A) HuMEC-1 y PBL se trataron durante 60 min a 37 °C. La TEM se realizó durante 120 min a 37 °C, 30 °C y 18°. (B) HuMEC-1 y PBL se trataron durante 60 min a 37 °C, 30 °C y 18 °C. El TEM se realizó durante 120 min en las mismas condiciones de temperatura que se trataron antes con HuMEC-1 y PBL. (C) HuMEC-1 y PBL se trataron durante 60 min a 37 °C, 30 °C o 18 °C con recalentamiento posterior a 37 °C durante TEM durante 120 min. Fuente: Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B by Bogert et al., Scientific Reports, Feb. 2016.

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BCECF, AM *UltraPure grade*

Bibliografía

Ver todas las 47 bibliografías: Citation Explorer

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Referencias

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Application Notes (en Ingles)

Calcein
Multi-Color Labeling and Functional Analysis of Live Cells Using Fluorescent Calcein AM Dyes
Multiplexing Cell Proliferation and Cytotoxicity Assays Using Calcein Red and CytoCalceins
Calcein
Multi-Color Labeling and Functional Analysis of Live Cells Using Fluorescent Calcein AM Dyes