Kit de análisis de captación de ácidos grasos fluorimétricos Screen Quest™

Este kit de ensayo Screen Quest™ proporciona un método simple y sensible para la medición de la captación de ácidos grasos en células que contienen transportadores de ácidos grasos.

Descripción

Kit de análisis de captación de ácidos grasos fluorimétricos Screen Quest™

La captación de ácidos grasos es un objetivo terapéutico importante para el tratamiento de muchas enfermedades humanas como la obesidad, la diabetes tipo 2 y la esteatosis hepática.

El kit de ensayo fluorométrico de captación de ácidos grasos Screen Quest™ proporciona un método simple y sensible para la medición de la captación de ácidos grasos en células que contienen transportadores de ácidos grasos. El kit utiliza un sustrato de ácido graso fluorescente de ácido dodecanoico patentado.

Este kit de ensayo de captación de ácidos grasos se puede realizar en cualquier lector de microplacas de fluorescencia con un modo de lectura inferior o canal FITC. El ensayo se puede realizar en placas de microtitulación de 96 pozos o de 384 pozos en un procedimiento simple de mezcla y lectura, y se puede adaptar fácilmente para aplicaciones que requieren alto volumen de detección.  Kit para 100 pruebas.

Nombre en ingles: Screen Quest™ Fluorimetric Fatty Acid Uptake Assay Kit

CatalogoProductoPresentación
36385Kit de análisis de captación de ácidos grasos fluorimétricos Screen Quest™100 pruebas

Importante: Solo para uso en investigación (RUO).

Plataforma

Lector de microplacas de Fluorescencia

Excitación485 nm
Emisión515 nm
Cutoff495 nm
Placa recomendadaPared negra / fondo claro
Especificacion instrumentoModo de lectura inferior

Componentes

Componente A: TF2-C12 Fatty Acid1 vial (liofilizado)
Componente B: Buffer de ensayo1 botella (10 mL)
Componente C: DMSO1 vial (100 µL)

PREPARACION DE SOLUCION DE STOCK

A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.

Solución madre de ácidos grasos TF2-C12:
Agregue 20 µL de DMSO (Componente C) al vial de Ácido graso TF2-C12 (Componente A) y mezcle bien. Nota: 20 μL de la solución madre de sustrato de ácido graso fluorescente es suficiente para una placa. La solución madre de sustrato de ácido graso fluorescente no utilizada se puede dividir en alícuotas y almacenar a < -20 oC durante un máximo de dos meses si los tubos se sellan herméticamente y se mantienen alejados de la luz. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.


PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO

Solución de carga de colorantes de ácidos grasos:
Agregue 20 µl de la solución madre de ácidos grasos TF2-C12 a 10 ml de buffer de ensayo (componente B) y mézclelos bien. Nota: 10 ml de solución de carga de colorante de ácidos grasos es suficiente para una placa; prepárelo fresco para cada experimento.

Imagenes

Figura 1. Comparación de la captación de ácidos grasos por adipocitos 3T3-L1 y fibroblastos. Las células se sembraron 50.000 células/100 ml/pozo en placa de 96 pozos  con  poli-D lisina  de fondo transparente/pared negra  durante 5 horas, y luego se privaron de suero durante 1 hora. Las células se trataron sin (control) o con insulina (150 nM), y se incubaron a 37 ºC,  con CO2 al 5 % durante 30 min. Al final del tiempo de incubación, se añadieron 100 µl de mezcla de ácidos grasos al  pozo y se incubó durante otros 60 min. La señal de fluorescencia se midió con un lector de placas FlexStation utilizando el modo de lectura inferior. A – fibroblastos (Control); B – fibroblastos (Insulina); C – adipocitos (Control); D– adipocitos (Insulina).

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Bibliografía

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Referencias

Ver todas las 69 referencias: Citation Explorer

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