La familia iFluor® 594 es independiente del pH de pH 3 a 11. Estas características espectrales hacen de esta nueva familia de colorantes una excelente alternativa a Texas Red® y Alexa Fluor® 594.
Descripción
Los tintes iFluor® de AAT Bioquest están optimizados para marcar proteínas, en particular anticuerpos. Los colorantes iFluor® 594 tienen un máximo de excitación y emisión de fluorescencia de ~588 nm y ~604 nm respectivamente. La familia iFluor® 594 tiene propiedades espectrales similares a las de Texas Red® y Alexa Fluor® 594 (Texas Red® y Alexa Fluor® 594 son marcas comerciales de Invitrogen).
La familia iFluor® 594 es independiente del pH de pH 3 a 11. Estas características espectrales hacen de esta nueva familia de colorantes una excelente alternativa a Texas Red® y Alexa Fluor® 594. En comparación con Texas Red®, iFluor® 594 es mucho más fácil de conjugar con RPE con un rendimiento de conjugación mucho mayor, y el tándem RPE-iFluor® 594 resultante tiene una mejor eficiencia de FRET.
iFluor® 594 SE es razonablemente estable y muestra buena reactividad y selectividad con los grupos amino de proteínas.
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-1029 | iFluor® 594 succinimidyl ester | 1mg |
| AAT-71029 | iFluor® 594 succinimidyl ester | 100 ug |
| AAT-71508 | iFluor® 594 succinimidyl ester | 5mg |
| AAT-71558 | iFluor® 594 succinimidyl ester | 10mg |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento: Congelación (< -15 °C). Minimizar la exposición a la luz.
Propiedades fisicas
| Peso Molecular | 1160.42 |
| Disolvente | DMSO |
Espectro
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Propiedades espectrales
| Absorbancia (nm) | 587 |
| Factor de corrección (260 nm) | 0.05 |
| Factor de corrección (280 nm) | 0.04 |
| Coeficiente de extinción (cm -1 M -1) | 1800001 |
| Excitación (nm) | 588 |
| Emisión (nm) | 604 |
| Rendimiento cuántico | 0.531 |
Calculadora
Preparación de la solución de stock común
Volumen de DMSO necesario para reconstituir la masa específica de succinimidil éster iFluor® 594 a la concentración dada. Tenga en cuenta que el volumen es solo para preparar la solución madre. Consulte el protocolo experimental de la muestra para conocer los buffers experimentales/fisiológicos apropiados.
| 0.1 mg | 0.5 mg | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 86.176 µL | 430.878 µL | 861.757 µL | 4.309 mL | 8.618 mL |
| 5 mM | 17.235 µL | 86.176 µL | 172.351 µL | 861.757 µL | 1.724 mL |
| 10 mM | 8.618 µL | 43.088 µL | 86.176 µL | 430.878 µL | 861.757 µL |
Imagenes
Figura 1. Las células HeLa se tiñeron con (Tubulin+) o sin (Tubulin-) antitubulina de ratón y luego se visualizaron con iFluor® 594 cabra anti-ratón IgG (izquierda) o con Alexa Fluor® 594 cabra anti-ratón IgG (derecha).
Figura 2. Las células HeLa se tiñeron con antitubulina de ratón seguido de iFluorTM 594 de cabra anti-ratón IgG (H+L) (rojo); los filamentos de actina se tiñeron con conjugado Phalloidin-iFluorTM 488 (verde); y los núcleos se tiñeron con DAPI (azul).
Figura 3. Arriba) El patrón espectral se generó usando un citómetro espectral de 4 láseres. Se utilizaron láseres desplazados espacialmente (355 nm, 405 nm, 488 nm y 640 nm) para crear cuatro perfiles de emisión distintos y luego, cuando se combinaron, produjeron la firma espectral general. Abajo) Análisis de citometría de flujo de células de sangre completa teñidas con conjugado de PE/iFluor® 594 anti-CD4 humano *SK3*. La señal de fluorescencia se controló utilizando un citómetro de flujo Aurora en el canal B6-A específico de PE/iFluor® 594.
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Referencias
Ver todas las 49 referencias: Citation Explorer
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Application Notes
iFluor® Dye Selection Guide
A New Protein Crosslinking Method for Labeling and Modifying Antibodies
Abbreviation of Common Chemical Compounds Related to Peptides
Bright Tide Fluor™-Based Fluorescent Peptides and Their Applications In Drug Discovery and Disease Diagnosis
FITC (Fluorescein isothiocyanate)
FAQ
What are common laser lines used in flow cytometry?
What are the spectral properties of iFluor dyes?
Are any of the cyanine dyes infrared?
Are coumarin dyes pH sensitive?
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