Kit de ensayo para el gen reportero de la luciferasa Amplite®, *Bright Glow*. Este kit utiliza una formulación luminogénica patentada para cuantificar la actividad de la luciferasa en células vivas y extractos celulares.
Descripción
Los genes indicadores comunes incluyen beta-galactosidasa, beta-glucuronidasa y luciferasa. Las ventajas de un ensayo de luciferasa son la alta sensibilidad, la ausencia de actividad de luciferasa dentro de la mayoría de los tipos de células, el amplio rango dinámico, la rapidez y el bajo costo. El gen indicador más versátil y común es la luciferasa de la luciérnaga norteamericana Photinus pyralis. La proteína no requiere modificación postraduccional para la actividad enzimática. Ni siquiera es tóxico en alta concentración (in vivo) y puede usarse en células procariotas y eucariotas. La luciferasa de luciérnaga cataliza la oxidación bioluminiscente de la luciferina en presencia de ATP, magnesio y oxígeno.
Este kit de ensayo del gen reportero de luciferasa Amplite® utiliza una formulación luminogénica patentada para cuantificar la actividad de la luciferasa en células vivas y extractos celulares. Nuestra formulación genera un producto luminiscente que da una fuerte luminiscencia al interactuar con la luciferasa. El kit proporciona todos los componentes esenciales con nuestro protocolo de ensayo optimizado de “mezclar y leer” que es compatible con los instrumentos de manejo de líquidos HTS. Tiene una sensibilidad extremadamente alta y se puede utilizar para los ensayos que requieren una sensibilidad exigente.
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-12518 | Amplite® Luciferase Reporter Gene Assay Kit *Bright Glow* | 1 placa |
| AAT-12519 | Amplite® Luciferase Reporter Gene Assay Kit *Bright Glow* | 10 placas |
| AAT-12520 | Amplite® Luciferase Reporter Gene Assay Kit *Bright Glow* | 100 placas |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO).
Plataforma
Lector de microplacas de luminiscencia
| Placa recomendada | Blanca sólida |
Componentes
| Componente A: Luciferase Sensor (Light-sensitive) | 1 botella |
| Componente B: Buffer de ensayo | 1 botella (10 mL) |
PREPARACION CELULAR
Para obtener guia sobre la preparación de muestras de células, visite: https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO
1. Para el # de catálogo 12518, transfiera todo el contenido del buffer de reacción (componente B) a la botella del sensor de luciferasa (componente A) y mezcle bien para que la solución del sensor de luciferasa funcione.
2. Para el # de cat. 12519, agregue 10 ml de buffer de reacción (componente B) y para el # de cat. 12520, agregue 100 ml de buffer de reacción (componente B) en la botella del sensor de luciferasa (componente A) y mezcle bien. Luego, vuelva a transferir la solución resultante a la botella de buffer de reacción (componente B). Se necesitan múltiples lavados para transferir completamente el contenido. Nota: La solución de trabajo del sensor de luciferasa reconstituida no es estable. Proteger de la luz.
Imagen
Figura 1. Cinética de reacción de las células CHO-V2R-Luc utilizando el kit de ensayo de gen informador de luciferasa Amplite®. Las células CHO transfectadas de forma estable con el gen pCRE-luciferasa y el receptor 2 de vasopresina humana (V2R) se sembraron en una placa costar de fondo transparente/pared blanca de 384 pocillos a 15.000 células/pocillo/25 µl. Luego, las células se trataron con 100 nM de vasopresina en una incubadora de CO2 al 5 % a 37 °C durante 4 horas. Se añadieron al pocillo 25 µl de solución de ensayo de luciferasa. Los datos cinéticos se tomaron cada 30 minutos durante un máximo de 3 horas con un lector de placas NOVOstar (BMG Labtech). La señal de luciferasa inducida por vasopresina es estable durante más de 3 horas.
Bibliografía
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Referencias
Ver todas las 52 referencias: Citation Explorer
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Ameliorative Effect of Novel Vitamin Formula with Herbal Extracts on Scopolamine-Induced Alzheimer’s Disease
An Increase in Plasma Homovanillic Acid with Cocoa Extract Consumption Is Associated with the Alleviation of Depressive Symptoms in Overweight or Obese Adults
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