Este kit de de peroxidación lipídica colorimétrica intracelular Cell Meter™ ofrece el método más rápido y conveniente para medir MDA sin los pasos de calentamiento TBARS.
Descripción
La peroxidación lipídica se caracteriza por la degradación oxidativa de los ácidos grasos insaturados, fosfolípidos, glicolípidos, ésteres de colesterol y colesterol. El malondialdehído (MDA) es uno de los biomarcadores más utilizados para la peroxidación lipídica. Ensayo Cell Meter™ de peroxidación lipídica colorimétrica intracelular (MDA).
Históricamente, la medición de MDA se ha basado en una reacción con ácido tiobarbitúrico (TBA) para generar un producto que se puede medir colorimétrica o fluorométricamente. Sin embargo, el ensayo TBA tiene bastantes limitaciones. (1). La reacción no es específica de la MDA. (2). La reacción de TBA-MDA debe realizarse en condiciones ácidas. (3). Los ensayos deben realizarse a alta temperatura, normalmente entre 90 y 100 ºC.
Los ensayos comerciales de MDA basados en TBA son extremadamente tediosos debido a estas limitaciones. Este kit de cuantificación de peroxidación lipídica (MDA) colorimétrica Cell Meter™ ofrece el método más rápido y conveniente para medir MDA sin los pasos de calentamiento TBARS. MDA Blue™ reacciona con MDA para generar un producto de color azul que se mide a 695 nm con un lector de microplacas de absorbancia. Este ensayo es muy rápido y específico para MDA con poca interferencia de otros aldehídos.
Producto en Inlges: Cell Meter™ Intracellular Colorimetric Lipid Peroxidation (MDA) Assay Kit
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-15991 | Ensayo Cell Meter™ de peroxidación lipídica colorimétrica intracelular (MDA) | 200 pruebas |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO).
Plataforma
Lector de Microplacas de Absorbancia
| Absorbancia | 695 nm |
| Placa recomendada | Fondo transparente |
Componentes
| Componente A: MDA Blue™ | 1 vial |
| Componente B: Buffer de dilución | 1 botella (10 mL) |
| Componente C: MDA Standard | 1 vial (liofilizado) |
| Componente D: Solucion de reacción | 1 botella (10 mL) |
PREPARACION DE SOLUCIONES DE STOCK
A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.
Solución madre estándar de MDA (100 mM)
Agregue 100 µl de ddH2O al estándar MDA (componente C) y mézclelos bien. Nota: La solución madre de MDA no utilizada debe almacenarse a -20 °C en alícuotas de un solo uso.
PREPARACION DE SOLUCION ESTANDAR
Para mayor comodidad, utilice el Planificador de dilución en serie:
https://www.aatbio.com/tools/serial-dilution/15991
Estándar MDA
Agregue 10 μL de estándar MDA (100 mM) en 990 μL de buffer de dilución (componente B) para obtener una solución estándar de MDA (1000 μM). A continuación, realice diluciones en serie en el buffer de dilución para obtener estándares de MDA diluidos en serie de 800, 600, 400, 200, 100, 50 y 0 μM.
Imagenes
Figura 1. . La respuesta a la dosis de MDA se midió con el kit de cuantificación de peroxidación lipídica colorimétrica (MDA) Amplite® en una microplaca de fondo transparente de 96 p pozos utilizando un lector de microplacas SpectraMax (Molecular Devices). (Pathcheck activado (Imagen izquierda); Pathcheck desactivado (Imagen derecha))
Figura 2. Comparación de señales de MDA, formaldehído y gliceraldehído.
Figura 3. La respuesta a la dosis de MDA se midió con el kit de cuantificación de peroxidación lipídica colorimétrica (MDA) Amplite® en una microplaca de fondo transparente de 96 pocillos utilizando un lector de microplacas SpectraMax (Molecular Devices).
Bibliografía
Ver todas las 21 referencias: Citation Explorer
Assessment of lipid peroxidation by measuring malondialdehyde (MDA) and relatives in biological samples: Analytical and biological challenges.
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Formation of Malondialdehyde, 4-Hydroxynonenal, and 4-Hydroxyhexenal during in Vitro Digestion of Cooked Beef, Pork, Chicken, and Salmon
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Journal: Diabetes Res Clin Pract (2005): 29
Application Notes
A Comparison of Fluorescent Red Calcium Indicators for Detecting Intracellular Calcium Mobilization in CHO Cells
A Meta-Analysis of Common Calcium Indicators
A New Red Fluorescent & Robust Screen Quest™ Rhod-4™ Ca2+Indicator for Screening GPCR & Ca2+ Channel Targets
A New Robust No-Wash FLIPR Calcium Assay Kit for Screening GPCR and Calcium Channel Targets
A Novel Fluorescent Probe for Imaging and Detecting Hydroxyl Radical in Living Cells
FAQ
What is lipid peroxidation?
Are NADH and ROS related?
Are there any alternatives for ethidium bromide in agarose gels?
Are there any alternatives to Cy5?
Are there any calcium indicators that don’t require probenecid (PBC)?
AssayWise
Intracellular Nitric Oxide (NO) Assays
Intracellular Total ROS Activity Assays
Multicolor Intracellular Calcium Detection Probes
Nucleic Acid Quantification
Cal-520™ Calcium Indicators