El Ensayo de Viabilidad celular Cell Meter™ es útil para una variedad de estudios, incluida la adhesión celular, la quimiotaxis, la resistencia a múltiples fármacos, la viabilidad celular, la apoptosis y la citotoxicidad.
Descripción
Ensayo de Viabilidad celular Cell Meter™
Nuestros kits de ensayo Cell Meter™ son un conjunto de herramientas para monitorear la viabilidad celular. Hay una variedad de parámetros que se pueden usar para monitorear la viabilidad celular.
Este kit utiliza un tinte no fluorescente patentado que mejora la fluorescencia roja al entrar en las células vivas. El colorante es un compuesto hidrofóbico que penetra fácilmente en las células vivas intactas. La hidrólisis del sustrato no fluorescente por esterasas intracelulares genera un producto hidrofílico fuertemente fluorescente que se retiene bien en el citoplasma celular. La actividad de la esterasa es proporcional al número de células viables y, por lo tanto, está directamente relacionada con la intensidad de la fluorescencia del producto generado a partir de la hidrólisis catalizada por la esterasa del sustrato fluorogénico. Las células cultivadas en placas de paredes negras se pueden teñir y cuantificar en menos de dos horas.
El ensayo es más sólido que los ensayos basados en sal de tetrazolio o Alarmar Blue™. Se puede adaptar fácilmente para ensayos de alto rendimiento en una amplia variedad de plataformas de fluorescencia, como ensayos en microplaca, inmunocitoquímica y citometría de flujo. Es útil para una variedad de estudios, incluida la adhesión celular, la quimiotaxis, la resistencia a múltiples fármacos, la viabilidad celular, la apoptosis y la citotoxicidad.
El kit proporciona todos los componentes esenciales con un protocolo de etiquetado celular optimizado. Es adecuado para células proliferantes y no proliferativas, y se puede utilizar tanto para células en suspensión como adherentes. El indicador fluorogénico tiene propiedades espectrales compatibles con el juego de filtros Cy3/TRITC.
Nombre en Ingles: Cell Meter™ Cell Viability Assay Kit Red Fluorescence
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-22783 | Kit de ensayo de viabilidad celular Cell Meter™ Fluorescencia Roja | 200 pruebas |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO).
Plataforma
Lector de Microplacas de Fluorescencia
| Excitación | 540 nm |
| Emisión | 590 nm |
| Cutoff | 570 nm |
| Placa recomendada | Pared negra /fondo claro |
| Especificaciones instrumento | Modo de lectura inferior |
Componentes
| Componente A: CytoCalcein™ Red AM | 2 viales, liofilizados |
| Componente B: DMSO | 1 vial (100 µL) |
| Componente C: Buffer de ensayo | 1 botella de 20ml |
Preparación de solución de stock
A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.
- Solución madre CytoCalcein™ Red AM:
Agregue 20 µL de DMSO (Componente B) en el vial de CytoCalcein™ Red AM (Componente A) y mezcle bien para preparar la solución madre de CytoCalcein™ Red AM. Nota: 20 µL de solución madre CytoCalcein™ Red AM es suficiente para una placa. Proteger de la luz. Para el almacenamiento, selle los tubos herméticamente. Nota: La solución madre de CytoCalcein™ Red sin usar puede dividirse en alícuotas y almacenarse a < -20oC durante un mes si los tubos están sellados herméticamente. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.
Preparación de solución de trabajo
Agregue todo el contenido (20 µL) de la solución madre de CytoCalcein™ Red AM en 10 mL de Tampón de ensayo (Componente C) y mezcle bien para preparar la solución de trabajo de CytoCalcein™ Red AM. Nota: Esta solución de trabajo CytoCalcein™ Red AM no es estable, úsela de inmediato. Nota: si las células, como las células CHO, contienen transportadores de aniones orgánicos que provocan la fuga del tinte fluorescente con el tiempo, se debe preparar una solución madre de probenecid y agregarla al tampón de carga a una concentración de trabajo final en el pozo de 1 -2,5 mM. Haga alícuotas y almacene la solución madre de probenecid no utilizada a ≤ -20 oC.
Para conocer guias sobre la preparación de muestras de células, visite: https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
Imagen
Figura 1. La respuesta del número de células HeLa se midió con el kit de ensayo de viabilidad celular Cell Meter™. Se sembraron células HeLa de 0 a 3000 células/pocillo/100 µl durante la noche en una placa de 96 pocillos Costar de pared negra/fondo transparente. Las células se incubaron con 100 µL/pocillo de solución de trabajo de colorante CytoCalcein™ Red durante 30 minutos a 37°C. La intensidad de la fluorescencia se midió a Ex/Em = 540/590 nm (corte = 570 nm) con el modo de lectura inferior utilizando Flexstation (de Molecular devices).
Formatos alternativos
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Bibliografía
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Referencias
Ver todas las 84 referencias: Citation Explorer
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Application notes
Annexin V
Calcein
Multi-Color Labeling and Functional Analysis of Live Cells Using Fluorescent Calcein AM Dyes
Multiplexing Cell Proliferation and Cytotoxicity Assays Using Calcein Red and CytoCalceins
Relative Brightness of Fluorescent Dyes
FAQ
Are there any alternatives to BrdU (Bromodeoxyuridine)?
Are there upgraded trypan blue derivatives for cell viability testing?
Is Calcein, AM toxic to cells?
What are common laser lines used in flow cytometry?
What does trypan blue do?