La Agarosa HighSpec Rho1D4 se desarrolló para la purificación por afinidad de proteínas con un etiqueta rho1D4 (secuencia de proteína TETSQVAPA). Esta matriz de cromatografía de afinidad se basa en perlas de trabajo BioWorks que consisten en un 7.5% de cruce interacción de proteínas.
Descripción
La resina de agarosa HighSpec Rho1D4 es una suspensión de perlas de agarosa de 40 µm acopladas a un anticuerpo anti-Rho1D4. Está diseñado para ensayos de purificación de proteínas de la mayor pureza posible, aprovechando la especificidad de un anticuerpo para su antígeno. Puede leer más sobre la etiqueta Rho1D4 aquí.
También puede comprar estas perlas de agarosa empaquetadas en cartuchos listos para FPLC. Además, ofrecemos resina de afinidad Rho1D4-tag con un diámetro de perla de 400 µm para medios celulares muy viscosos y tasas de flujo de FPLC más altas. Como alternativa, también están disponibles Rho1D4 MagBeads, si prefiere este método de cromatografía de afinidad.
Los productos de soporte adicionales para los ensayos de purificación de etiquetas Rho1D4 son el péptido Rho1D4, un compuesto esencial del tampón de elución, y nuestro anticuerpo Rho1D4 para la detección posterior de su proteína por transferencia Western.
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| CU-33101 | Agarosa HighSpec Rho1D4 | 1ml |
| CU-33102 | Agarosa HighSpec Rho1D4 | 5ml |
| CU-33103 | Agarosa HighSpec Rho1D4 | 10 ml |
| CU-33104 | Agarosa HighSpec Rho1D4 | 25 ml |
Hojas de datos y Protocolos
- Rho1D4 Agarose Datasheet
- Rho1D4 Agarose Purification Protocol
- Rho1D4 Agarose MINI Batch Spin Protocol
- Rho1D4 Agarose MIDI Batch Spin Protocol
- Rho1D4 Beads Washing & Regeneration Protocol
- Rho1D4-tag western blot Protocol
- Cartridge Packing Protocol
¿Está utilizando la etiqueta Rho1D4 por primera vez? Para este caso, recomendamos utilizar uno de nuestros tres kits de inicio Rho1D4. Cada uno combinó uno de nuestros productos de purificación Rho1D4-tag + 5 mg del péptido de elución Rho1D4.
• Kit de inicio 1: Agarosa Rho1D4 + 5 mg de péptido Rho1D4
• Kit de inicio 2: Rho1D4 MagBeads+ 5 mg de péptido Rho1D4
• Kit de inicio 3: Cartucho compacto Rho1D4 + 5 mg de péptido Rho1D4
Caracteristicas
| Uso | Unión específica y purificación de proteínas etiquetadas con Rho1D4 |
| Especificidad | Afinidad por las proteínas marcadas con Rho1D4 (TETSQVAPA) |
| Capacidad de union | >3 mg/ml |
| Bead Ligand | anti-Rho1D4 antibody |
| Tamaño perla | 40 μm |
| Matrix | 7.5% cross-linked agarose |
| Rangos de flujo recomendados | 0.25 – 1 ml/min |
| Rango flujo máximo | 6 ml/min |
| Cantidad llenado | Entregado como una suspensión a 50% |
| Almacenamiento corto plazo | En buffer neutral a 4°C |
| Almacenamiento largo plazo | En buffer neutral con 20% etanol a 4°C |
| Equipo requerido | – Buffer de Lisis – Buffer de lavado – Buffer de Elucion Buffer (incl. Rho1D4 peptide) – Ice bath – Centrifuga Refrigerada para tubos de 50 mL (min 10,000 x g) – Tubos para centrifuga de 50 mL – Micropipeta y micropuntas – Columnas 2ml desechables, flujo de gravedad con salida inferior con tapa – Medidor pH – Agitador End-over-end – SDS-PAGE buffers, Opcional: reactivos y equipo para Western Blot |
Resultado de Laboratorio
Los productos de purificación Rho1D4-tag son especialmente útiles cuando se trata de la purificación de proteínas con poca abundancia. Y un gran grupo de estas proteínas son las proteínas de membrana. Incluso sobreexpresada, su concentración no se acerca a la de sus contrapartes solubles.
La figura 1 muestra la purificación de cuatro proteínas de membrana diferentes. Cada vez que la purificación ha dado como resultado una gran pureza y mucha proteína.
Figura 1: Ejemplo de purificaciones de etiquetas Rho1D4 utilizando Rho1D4 MagBeads. Los cuatro western blots anti-Rho1D4 representados muestran un mutante diferente de la proteína de superficie SPIKE del SARS-CoV-2. A: mutante alfa B.1.1.7 B: mutante beta B.1.351 C: mutante Epsilon B.1.429 D: mutante Eta B.1.525
FAQ
• ¿Puedo usar la etiqueta Rho1D4 también para proteínas que no son de membrana?
R: Si es posible.
• Nunca antes había oído hablar de la etiqueta Rho1D4. ¿Qué me puedes decir al respecto?
R: Por supuesto. Todas sus preguntas deben ser respondidas en nuestra página de información sobre etiquetas Rho1D4.
• Uso la etiqueta FLAG (DYKDDDDK) para mis purificaciones de proteínas. ¿Es beneficioso para mí cambiar a la etiqueta Rho1D4?
R: ¡Sí, definitivamente lo es! Eche un vistazo a esta comparación lado a lado de los dos.
• ¿Puedo regenerar y reutilizar sus perlas de glutatión?
R: ¡Sí es posible! Simplemente siga nuestro protocolo.
Menciones
Proteina Purificada Año Autor
Descargo de responsabilidad: Nuestros productos están destinados a aplicaciones de biología molecular. Estos productos no están destinados al diagnóstico, prevención o tratamiento de una enfermedad.