El derivado de acetometoxi (AM) de la calceína (Calcein AM) se usa ampliamente para marcar células vivas, ya que puede transportarse a través de la membrana celular hacia las células vivas.
Descripción
Calcein AM pasa fácilmente a través de la membrana celular de las células viables debido a su mayor hidrofobicidad en comparación con la Calceína. El derivado de acetometoxi (AM) de la calceína (calceína AM) se usa ampliamente para marcar células vivas, ya que puede transportarse a través de la membrana celular hacia las células vivas.
Los grupos éster AM enmascaran la parte de la molécula que quela el calcio. Al transportarse a las células vivas, las esterasas celulares cortan los grupos AM, la molécula se une al calcio dentro de la célula (lo que resulta en la adquisición de una fuerte fluorescencia verde) y queda atrapada en el interior. Como las células muertas carecen de esterasas, solo se marcan las células vivas. Esta característica lo hace muy útil para probar la viabilidad celular y para el marcado de células a corto plazo.
En comparación con otros reactivos de marcado de células vivas (como BCECF-AM y diacetato de carboxifluoresceína), la calceína-AM es la sonda fluorescente más adecuada para teñir células viables debido a su baja citotoxicidad. La calceína no afecta significativamente las funciones celulares como la proliferación o la quimiotaxis de los linfocitos. Además, los ensayos de viabilidad que utilizan calceína son fiables y se correlacionan bien con el ensayo estándar de liberación de 51Cr.
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| 22002 | Calcein, AM *CAS 148504-34-1* | 1 mg |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento: Congelar (< -15 °C); Minimizar la exposición a la luz
Plataforma
Citómetro de Flujo
| Excitación de laser | 488 nm |
| Filtro de emisión | 530/30 nm |
| Especificaciones instrumento | FITC channel |
Microscopio de Fluorescencia
| Excitación | FITC |
| Emisión | FITC |
| Placa recomendada | Pared negra, fondo claro |
Lector de microplacas de fluorescencia
| Excitación | 490 nm |
| Emisión | 525 nm |
| Corte | 515 nm |
| Placa Recomendada | Pared negra, fondo claro |
| Especificaciones instrumento | Modo de lectura inferior |
Propiedades fisicas
| Peso Molecular | 994.86 |
| Disolvente | DMSO |
Espectro
Abrir en Advanced Spectrum Viewer
Propiedades espectrales
| Coeficiente de extinción (cm -1 M -1) | 81000 |
| Exitación (nm) | 501 |
| Emisión (nm) | 521 |
Calculadora
Preparación de la solución de stock común
Volumen de DMSO necesario para reconstituir la masa específica de calceína, AM CAS 148504-34-1 a la concentración dada. Tenga en cuenta que el volumen es solo para preparar la solución madre. Consulte el protocolo experimental de muestra para conocer los buffers experimentales/fisiológicos apropiados.
| 0.1 mg | 0.5 mg | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 100.517 µL | 502.583 µL | 1.005 mL | 5.026 mL | 10.052 mL |
| 5 mM | 20.103 µL | 100.517 µL | 201.033 µL | 1.005 mL | 2.01 mL |
| 10 mM | 10.052 µL | 50.258 µL | 100.517 µL | 502.583 µL | 1.005 mL |
Imagenes
Figura 1. Imágenes simultáneas de células HeLa vivas y apoptóticas marcadas con calceína AM (cat. 22002) y conjugado de anexina V-iFluor® 647 (cat. 20074).
Figura 2. Imágenes de células vivas HeLa teñidas con Calcein, AM (Cat.22002).
Figura 3. Imágenes de células vivas HeLa teñidas con Calcein, AM (Cat.22002). Los núcleos celulares se tiñeron con Hoechst 33342 (Blue, Cat#17535).
Figura 4. Esquema de modulación de temperatura experimental. Las células se mantuvieron inicialmente a 37 °C. (A) HuMEC-1 y PBL se trataron durante 60 min a 37 °C. La TEM se realizó durante 120 min a 37 °C, 30 °C y 18°. (B) HuMEC-1 y PBL se trataron durante 60 min a 37 °C, 30 °C y 18 °C. El TEM se realizó durante 120 min en las mismas condiciones de temperatura que se trataron antes con HuMEC-1 y PBL. (C) HuMEC-1 y PBL se trataron durante 60 min a 37 °C, 30 °C o 18 °C con recalentamiento posterior a 37 °C durante TEM durante 120 min. Fuente: Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B by Bogert et al., Scientific Reports, Feb. 2016.
Productos Relacionados
Bibliografía
Ver todas las 47 bibliografías: Citation Explorer
Effervescent Atomizer as Novel Cell Spray Technology to Decrease the Gas-to-Liquid Ratio
Authors: Thiebes, Anja Lena and Klein, Sarah and Zingsheim, Jonas and M{\”o}ller, Georg H and G{\”u}rzing, Stefanie and Reddemann, Manuel A and Behbahani, Mehdi and Jockenhoevel, Stefan and Cornelissen, Christian G
Journal: Pharmaceutics (2022): 2421
Regulatory effect of long-stranded non-coding RNA-CRNDE on neurodegeneration during retinal ischemia-reperfusion
Authors: Sun, Ting-Ting and Li, Xiu-Miao and Zhu, Jun-Ya and Yao, Wen and Yang, Tian-Jing and Meng, Xiang-Rui and Yao, Jin and Jiang, Qin
Journal: Heliyon (2022): e10994
Sensing of Physical Factors by Cells: Electric Field, Mechanical Forces, Physical Plasma and Light—Importance for Tissue Regeneration
Authors: Bielfeldt, Meike and Rebl, Henrike and Peters, Kirsten and Sridharan, Kaarthik and Staehlke, Susanne and Nebe, J Barbara
Journal: Biomedical Materials \& Devices (2022): 1–16
Drug/bioactive eluting chitosan composite foams for osteochondral tissue engineering
Authors: Samie, Muhammad and Khan, Ather Farooq and Rahman, Saeed Ur and Iqbal, Haffsah and Yameen, Muhammad Arfat and Chaudhry, Aqif Anwar and Galeb, Hanaa A and Halcovitch, Nathan R and Hardy, John G
Journal: International Journal of Biological Macromolecules (2022)
The effects of acute exercise and inflammation on immune function in early-stage prostate cancer
Authors: Schauer, Tim and Djurhuus, Sissal Sigmundsd{\’o}ttir and Simonsen, Casper and Brasso, Klaus and Christensen, Jesper Frank
Journal: Brain, behavior, \& immunity-health (2022): 100508
pH-responsive biopolymer-based supramolecular architectures as biodegradable carriers for 1 DOX delivery 2
Authors: Nia, Marzieh Heidari and Ashkar, Said and Munguia-Lopez, Jose G and Kinsella, Joseph M and van de Ven, Theo GM
Journal: (2021)
Highly Concentrated Nitrogen-Doped Carbon Nanotubes in Alginate–Gelatin 3D Hydrogels Enable in Vitro Breast Cancer Spheroid Formation
Authors: Munguia-Lopez, Jose G and Jiang, Tao and Ferlatte, Audrey and Fajardo-Diaz, Juan L and Munoz-Sandoval, Emilio and Tran, Simon D and Kinsella, Joseph M
Journal: Advanced NanoBiomed Research (2021): 2100104
A novel flavonoid from Fissistigma cupreonitens, 5-hydroxy-7, 8-dimethoxyflavanone, competitively inhibited the efflux function of human P-glycoprotein and reversed cancer multi-drug resistance
Authors: Teng, Yu-Ning and Lin, Kun-I and Lin, Yu-Chao and Thang, Tran-Dinh and Lan, Yu-Hsuan and Hung, Chin-Chuan
Journal: Phytomedicine (2021): 153528
The COL-4A1 polypeptide destroy endothelial cells through the TGF-$\beta$/PI3K/AKT pathway
Authors: Li, Ting and Ling, Zhonghui and Xie, Kaipeng and Wang, Yixiao and Miao, Zhijing and Ji, Xiaohong and Li, Jingyun and Hou, Wenwen and Tang, Qiuqin and Yuan, Xiaojie and others,
Journal: Scientific Reports (2021): 1–10
On the relevance of ligament dynamics for cell survival in air-assisted bronchoscopic spray application
Authors: G{\”u}rzing, Stefanie and Klein, Sarah and M{\”o}ller, Georg and Thiebes, Anja Lena and Cornelissen, Christian Gabriel and Reddemann, Manuel Armin
Journal: Atomization and Sprays (2021)
Referencias
Functional evidence that the self-renewal gene NANOG regulates esophageal squamous cancer development
Authors: Li, Deng and Xiang, Xiaocong and Yang, Fei and Xiao, Dongqin and Liu, Kang and Chen, Zhu and Zhang, Ruolan and Feng, Gang
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)
Localized functional chemical stimulation of TE 671 cells cultured on nanoporous membrane by calcein and acetylcholine
Authors: Zibek S, Stett A, Koltay P, Hu M, Zengerle R, Nisch W, Stelzle M.
Journal: Biophys J. (2006)
A vaccination and challenge model using calcein marked fish
Authors: Klesius PH, Evans JJ, Shoemaker CA, Pasnik DJ.
Journal: Fish Shellfish Immunol (2006): 20
Novel fluorescence assay using calcein-AM for the determination of human erythrocyte viability and aging
Authors: Bratosin D, Mitrofan L, Palii C, Estaquier J, Montreuil J.
Journal: Cytometry A (2005): 78
Cytotoxic effects of 100 reference compounds on Hep G2 and HeLa cells and of 60 compounds on ECC-1 and CHO cells. I mechanistic assays on ROS, glutathione depletion and calcein uptake
Authors: Schoonen WG, Westerink WM, de Roos JA, Debiton E.
Journal: Toxicol In Vitro (2005): 505
Calcein AM release-based cytotoxic cell assay for fish leucocytes
Authors: Iwanowicz LR, Densmore CL, Ottinger CA.
Journal: Fish Shellfish Immunol (2004): 127
Calcein-AM is a detector of intracellular oxidative activity
Authors: Uggeri J, Gatti R, Belletti S, Sc and roglio R, Corradini R, Rotoli BM, Orl and ini G., undefined
Journal: Histochem Cell Biol (2004): 499
Comparison of the usefulness of the MTT, ATP, and calcein assays to predict the potency of cytotoxic agents in various human cancer cell lines
Authors: Mueller H, Kassack MU, Wiese M.
Journal: J Biomol Screen (2004): 506
In vitro assay of mineralized-tissue formation on titanium using fluorescent staining with calcein blue
Authors: Goto T, Kajiwara H, Yoshinari M, Fukuhara E, Kobayashi S, Tanaka T.
Journal: Biomaterials (2003): 3885
The effects of calcium chloride and sodium chloride on the electroporation-mediated skin permeation of fluorescein isothiocyanate (FITC)-dextrans in vitro
Authors: Tokudome Y, Sugibayashi K.
Journal: Biol Pharm Bull (2003): 1508
Application Notes (en Ingles)
Calcein
Multi-Color Labeling and Functional Analysis of Live Cells Using Fluorescent Calcein AM Dyes
Multiplexing Cell Proliferation and Cytotoxicity Assays Using Calcein Red and CytoCalceins
Calcein
Multi-Color Labeling and Functional Analysis of Live Cells Using Fluorescent Calcein AM Dyes