Conjugado iFluor® 647 Styramide es un reemplazo directo para Alexa Fluor 647 tyramide u otros reactivos TSA o conjugados de tiramida fluorescente espectralmente similares.
Descripción
Conjugado iFluor® 647 Styramide *Reemplazo superior para Alexa Fluor 647 tyramide*
El sistema Power Styramide™ Signal Amplification (PSA™) es uno de los métodos más sensibles que pueden detectar objetivos de abundancia extremadamente baja en células y tejidos, con una señal de fluorescencia mejorada de 10 a 50 veces mayor que los reactivos de tiramida (TSA) ampliamente utilizados.
En combinación con nuestros colorantes superiores iFluor® que tienen mayor intensidad de fluorescencia, mayor fotoestabilidad y mayor solubilidad en agua, los conjugados de Styramide™ marcados con colorantes iFluor® pueden generar señales de fluorescencia con una precisión y sensibilidad significativamente mayores (más de 100 veces) que el estándar ICC/ IF/IHC.
El PSA utiliza la actividad catalítica de la peroxidasa de rábano (HRP) para la deposición covalente de fluoróforos in situ. Los radicales PSA tienen una reactividad mucho mayor que los radicales tiramida, lo que hace que el sistema PSA sea mucho más rápido, robusto y sensible que los reactivos TSA tradicionales.
En comparación con los reactivos de tiramida, los conjugados Styramide™ tienen la capacidad de marcar el objetivo con mayor eficiencia y, por lo tanto, generar una señal de fluorescencia significativamente mayor.
Los conjugados de Styramide™ también permiten un consumo significativamente menor de anticuerpo primario en comparación con el método de conjugado directo estándar o la amplificación de tiramida con el mismo nivel de sensibilidad.
iFluor® 647 Styramide es un reemplazo directo para Alexa Fluor 647 tyramide u otros reactivos TSA o conjugados de tiramida fluorescente espectralmente similares.
Nombre en Ingles: iFluor® 647 Styramide *Superior Replacement for Alexa Fluor 647 tyramide*
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-45045 | iFluor® 647 Styramide | 100 pruebas |
Importante, Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento a largo plazo: Congelar a < -15 °C. Minimizar la exposición a la luz.
Plataforma
Microscopio de Flourescencia
| Excitación | Juego de filtros Cy5 |
| Emisión | Juego de filtros Cy5 |
| Placa recomendada | Pared negra/fondo transparente |
| Especificaciones instrumento | Juego de filtros Cy5 |
Espectro
Abrir en Advanced Spectrum Viewer
Propiedades Espectrales
| Factor de correción (260 nm) | 0.03 |
| Factor de correción (280 nm) | 0.03 |
| Factor de correción (656 nm) | 0.0793 |
| Coeficiente de extinción (cm -1 M -1) | 2500001 |
| Excitación (nm) | 656 |
| Emisión (nm) | 670 |
| Rendimiento cuántico | 0.251 |
Preparación de Soluciones de Stock
A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.
- Solución madre de Styramide™ (100X)
Agregue 100 µL de DMSO en el vial de conjugado de Styramide™ marcado con colorante iFluor™ para preparar una solución madre de Styramide™ 100X. Nota: Haga alícuotas de un solo uso y almacene la solución madre 100X sin usar a 2-8 oC en un lugar oscuro y evite repetir los ciclos de congelación y descongelación. - Solución madre de H2O2
Agregue 10 µL de peróxido de hidrógeno al 3 % (no incluido) a 90 µL de ddH2O. Nota: Prepare la solución 100X H2O2 fresca el día de su uso.
Preparación de Soluciones de Trabajo
- Solución de trabajo de Styramide™ (1X)
Cada 1 ml de buffer de reacción requiere 10 µl de solución madre de Styramide™ y 10 µl de solución madre de H2O2. Nota: Styramide™ proporcionado es suficiente para 100 pruebas en base a 100 µL de solución de trabajo de Styramide™ necesarios por cubreobjetos o por pocillo en una microplaca de 96 pocillos. Nota: La solución de trabajo Styramide™ debe usarse dentro de las 2 horas posteriores a la preparación y evitar la exposición directa a la luz. - Solución de trabajo de anticuerpo secundario-HRP
Realice la concentración adecuada de la solución de trabajo de anticuerpo secundario-HRP según las recomendaciones del fabricante.
Imagenes
Figura 1. Se marcó tejido pulmonar humano fijado con formalina e incluido en parafina (FFPE) con mAb de ratón anti-EpCAM seguido de IgG anti-ratón de cabra marcado con HRP (n.º de cat. 16728). La señal de fluorescencia se desarrolló utilizando iFluor® 647 styramide (Cat No. 45045) y se detectó con un juego de filtros Cy5. Los núcleos (azul) se contratiñeron con DAPI (Cat No. 17507).
Figura 2. El sistema Power Styramide™ Signal Amplification (PSA™) es uno de los métodos más sensibles que pueden detectar objetivos de abundancia extremadamente baja en células y tejidos con una señal de fluorescencia mejorada de 10 a 50 veces mayor que los reactivos de tiramida (TSA) ampliamente utilizados . En combinación con nuestros colorantes superiores iFluor® que tienen mayor intensidad de fluorescencia, mayor fotoestabilidad y mayor solubilidad en agua, los conjugados de Styramide™ marcados con colorantes iFluor® pueden generar señales de fluorescencia con una precisión y sensibilidad significativamente mayores (más de 100 veces) que el estándar ICC/ IF/IHC. El PSA utiliza la actividad catalítica de la peroxidasa de rábano picante (HRP) para la deposición covalente de fluoróforos in situ. Los radicales PSA tienen una reactividad mucho mayor que los radicales tiramida, lo que hace que el sistema PSA sea mucho más rápido, robusto y sensible que los reactivos TSA tradicionales.
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