Este conjugado de faloidina fluorescente verde (equivalente a la faloidina marcada con Alexa Fluor® 488) se une selectivamente a las actinas F con una fotoestabilidad mucho mayor que los conjugados de fluoresceína-faloidina.
Descripción
Este conjugado de faloidina fluorescente verde (equivalente a la faloidina marcada con Alexa Fluor® 488) se une selectivamente a las actinas F con una fotoestabilidad mucho mayor que los conjugados de fluoresceína-faloidina. Usados en concentraciones nanomolares, los derivados de faloidina son sondas convenientes para marcar, identificar y cuantificar actinas F en secciones de tejido permeabilizadas y fijadas con formaldehído, cultivos celulares o experimentos sin células.
La faloidina se une a los filamentos de actina con mucha más fuerza que a los monómeros de actina, lo que conduce a una disminución de la constante de velocidad para la disociación de las subunidades de actina de los extremos de los filamentos, lo que esencialmente estabiliza los filamentos de actina mediante la prevención de la despolimerización de los filamentos. Además, se encuentra que la faloidina inhibe la actividad de hidrólisis de ATP de la actina F. La faloidina funciona de manera diferente en varias concentraciones en las células. Cuando se introduce en el citoplasma en bajas concentraciones, la faloidina recluta las formas menos polimerizadas de actina citoplásmica, así como la filamina, en “islas” estables de polímeros de actina agregados, pero no interfiere con las fibras de tensión, es decir, haces gruesos de microfilamentos.
La propiedad de la faloidina es una herramienta útil para investigar la distribución de F-actina en las células al marcar la faloidina con análogos fluorescentes y usarlos para teñir los filamentos de actina para microscopía óptica. Los derivados fluorescentes de la faloidina han resultado ser de gran utilidad para localizar filamentos de actina en células vivas o fijas, así como para visualizar filamentos de actina individuales in vitro. Los derivados de la faloidina fluorescente se han utilizado como una herramienta importante en el estudio de las redes de actina a alta resolución. AAT Bioquest ofrece una variedad de derivados de faloidina fluorescente con diferentes colores para aplicaciones de imágenes multicolores.
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-23115 | Phalloidin-iFluor® 488 Conjugate | 300 pruebas |
Importante, Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento a largo plazo: Congelar a < -15 °C. Minimizar la exposición a la luz.
Propiedades físicas
| Peso molecular | -1100 |
| DMSO | DMSO |
Espectro
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Propiedades Espectrales
| Factor de correción (260 nm) | 0.21 |
| Factor de correción (280 nm) | 0.11 |
| Coeficiente de extinción (cm -1 M -1) | 750001 |
| Excitación (nm) | 491 |
| Emisión (nm) | 516 |
| Rendimiento cuántico | 0.91 |
Imagenes
Figura 1. Imágenes de fluorescencia de células HeLa teñidas con el conjugado Phalloidin-iFluor® 488 utilizando un microscopio de fluorescencia con un juego de filtros FITC (verde). Las células se fijaron en formaldehído al 4 %, se co-marcaron con colorante mitocondrial MitoLite™ Red FX600 (catálogo 2677, Rojo) y Nuclear Blue™ DCS1 (catálogo 17548, Azul).
Figura 2. Célula de cáncer de mama MDA-MB-231 creció durante 24 h. Las células se tiñeron con Phalloidin-iFluor 488 Conjugate (ATT Bioquest) siguiendo las instrucciones del fabricante. Las imágenes fueron adquiridas con un objetivo 63x/1.4NA en un microscopio con focal de escaneo láser Zeiss por la Instalación avanzada de bioimagen (ABIF) en McGill. Se muestra la Proyección de máxima intensidad de 19 imágenes con un espaciado de 0,2 um en Z.
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| Name | Excitation (nm) | Emission (nm) | Extinction coefficient (cm -1 M -1) | Quantum yield | Correction Factor (260 nm) | Correction Factor (280 nm) |
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| Phalloidin-iFluor® 405 Conjugate | 403 | 427 | 370001 | 0.911 | 0.48 | 0.77 |
| Phalloidin-iFluor® 514 Conjugate | 511 | 527 | 750001 | 0.831 | 0.265 | 0.116 |
| Phalloidin-iFluor® 532 Conjugate | 537 | 560 | 900001 | 0.681 | 0.26 | 0.16 |
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| Phalloidin-iFluor® 594 Conjugate | 588 | 604 | 1800001 | 0.531 | 0.05 | 0.04 |
| Phalloidin-iFluor® 633 Conjugate | 640 | 654 | 2500001 | 0.291 | 0.062 | 0.044 |
| Phalloidin-iFluor® 647 Conjugate | 656 | 670 | 2500001 | 0.251 | 0.03 | 0.03 |
| Phalloidin-iFluor® 680 Conjugate | 684 | 701 | 2200001 | 0.231 | 0.097 | 0.094 |
Bibliografía
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Referencias
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