DAPI es una tinción fluorescente que se une fuertemente al ADN. Se utiliza ampliamente en microscopía de fluorescencia. Además de marcar núcleos celulares, DAPI también se utiliza para la detección de micoplasma o ADN de virus en cultivos celulares.
Descripción
DAPI es una tinción fluorescente que se une fuertemente al ADN. Se utiliza ampliamente en microscopía de fluorescencia. Dado que DAPI atraviesa una membrana celular intacta, se puede utilizar para teñir células vivas además de células fijadas. Para la microscopía de fluorescencia, DAPI se excita con luz ultravioleta. Cuando se une a ADN de doble cadena, su máximo de absorción es de 358 nm y su máximo de emisión es de 461 nm. Un inconveniente de DAPI es que su emisión es bastante amplia. DAPI también se une al ARN, aunque no es tan fuertemente fluorescente como se une al ADN. Su emisión cambia a alrededor de 500 nm cuando se une al ARN. La emisión azul de DAPI es conveniente para los ensayos de multiplexación, ya que hay muy poca superposición de fluorescencia entre DAPI y moléculas fluorescentes verdes como la fluoresceína y la proteína fluorescente verde (GFP), o manchas fluorescentes rojas como Texas Red. Además de marcar núcleos celulares, DAPI también se utiliza para la detección de micoplasma o ADN de virus en cultivos celulares.
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-17507 | DAPI [4,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride] | 2 ml |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento: Congelar (<-15 °C). Minimizar la exposición a la luz.
Propiedades fisicas
| Peso Molecular | 350.25 |
| Disolvente | AGUA |
Espectro
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Propiedades espectrales
| Coeficiente de extinción (cm -1 M -1) | 27000 |
| Excitación (nm) | 359 |
| Emisión (nm) | 457 |
Calculadora
Preparación de la solución de stock común
Volumen de agua necesario para reconstituir la masa específica de DAPI [4,6-diamidino-2-fenilindol, diclorhidrato] *solución 10 mM en agua* a la concentración dada. Tenga en cuenta que el volumen es solo para preparar la solución madre. Consulte el protocolo experimental de muestra para conocer los buffers experimentales/fisiológicos apropiados.
| 0.1 mg | 0.5 mg | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 285.51 µL | 1.428 mL | 2.855 mL | 14.276 mL | 28.551 mL |
| 5 mM | 57.102 µL | 285.51 µL | 571.021 µL | 2.855 mL | 5.71 mL |
| 10 mM | 28.551 µL | 142.755 µL | 285.51 µL | 1.428 mL | 2.855 mL |
Imagenes
Figura 1. La infección por L. pneumophila aumenta la secreción de EV en las células THP-1. ( a ) Cantidad de vehículos eléctricos en respuesta a la infección por L. pneumophila. Las células THP-1 se trataron con IL-1β (1 ng/mL) o se infectaron con L. pneumophila (MOI 0,25 o 0,5, respectivamente) durante 24 h. La NTA se realizó con las distintas fracciones de partículas separadas por centrifugación diferencial. ( b ) Western blot para proteínas marcadoras exosómicas. Se utilizaron lisados de células enteras o sedimentos de 100 k derivados de células THP-1 no infectadas. Se cargaron cantidades iguales de proteína. (c) Microscopía electrónica de transmisión con sedimento de 100 k. Los EV purificados de las células THP-1 se fijaron y visualizaron después de la tinción negativa con acetato de uranilo. La barra de escala representa 100 nm. ( d ) Captación de vehículos eléctricos derivados de A549 por células THP-1. Las células A549 se tiñeron con el colorante de membrana PKH67. Los vehículos eléctricos se recolectaron (pellet de 100 k) y se incubaron con células THP-1 durante 1 o 3 h, respectivamente. Los núcleos se tiñeron con DAPI y se tomaron fotografías con un aumento original de 630x. A: Los datos se muestran como media + SEM de tres experimentos independientes. **p < 0.01, ***p < 0.001, ****p < 0.0001. B–D: resultados representativos. Fuente: La infección por Legionella pneumophila activa las células transeúntes de manera diferencial mediante vesículas de células bacterianas y huésped por Jung et al., Scientific Reports, julio de 2017.
Figura. 2 Estructura química de DAPI [4,6-diamidino-2-fenilindol, diclorhidrato] solución 10 mM en agua
Bibliografía
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Journal: Viruses (2022): 2373
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Journal: Biomedicines (2022): 1446
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Journal: Journal of Clinical Medicine (2022): 317
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Journal: Phytomedicine (2021): 153642
Referencias
Ver todas las 134 referencias: Citation Explorer
Reliable DNA ploidy determination in dehydrated tissues of vascular plants by DAPI flow cytometry–new prospects for plant research
Authors: Suda J, Travnicek P.
Journal: Cytometry A (2006): 273
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Journal: Chromosome Res (2006): 673
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Authors: Gichner T, Mukherjee A, Veleminsky J.
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Authors: Samatadze TE, Muravenko OM, Bol’sheva NL, Amosova AB, Gostimsckii SA, Zelenin AV.
Journal: Genetika (2005): 1665
DAPI fluorescence in nuclei isolated from tumors
Authors: Krishan A, D and ekar PD., undefined
Journal: J Histochem Cytochem (2005): 1033
Polarized fluorescence correlation spectroscopy of DNA-DAPI complexes
Authors: Barcellona ML, Gammon S, Hazlett T, Digman MA, Gratton E.
Journal: Microsc Res Tech (2004): 205
DNA quantification in nuclei of cultivated mushroom with DAPI staining
Authors: Pancheva EV, Volkova VN, Kamzolkina OV.
Journal: Tsitologiia (2004): 381
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Authors: Li M, Wu RS, Tsai JS.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2003): 4351
Quantification of sPLA2-induced early and late apoptosis changes in neuronal cell cultures using combined TUNEL and DAPI staining
Authors: Daniel B, DeCoster MA.
Journal: Brain Res Brain Res Protoc (2004): 144