DIBMA Screening Kit, HEPES (4x3x50 mg)

Descripción

Las proteínas de membrana y sus características y necesidades son tan versátiles como la propia célula. Por esta razón, lamentablemente es imposible predecir con absoluta precisión qué producto DIBMA es el más adecuado para la solubilización y posterior purificación de su proteína de membrana de interés.

Para ayudarlo en la decisión final sobre el producto, ofrecemos este kit de detección de DIBMA que consta de nuestros cuatro DIBMA individuales, cada uno de ellos protegido en HEPES. De esta manera, tiene una opción conveniente para seleccionar el mejor DIBMA para su proteína en condiciones estables antes de ampliar su ensayo. En caso de que desee extender su cribado de polímeros más allá de los alcances de DIBMA, ofrecemos nuestro kit de cribado de nanodisco sintético, que cubre tanto SMA como DIBMA.

Catalogo	Producto	Presentación
CU-18101	DIBMA Screening Kit, HEPES	(4x3x50 mg)

Caracteristicas

	DIBMA 10	DIBMA 12	DIBMA GLYCEROL	DIBMA GLUCOSAMINE
Formula Weight	10,000 Da	12,000 Da	10,000 Da	10,000 Da
Solubility	> 10 % in H2O
Absorbance at 280 nm	< 0.3 (1 % solution)
Mg2+ Tolerance	25 mM	25 mM	>50 mM	>50 mM
Ca2+ Tolerance	starts to precipitate at 50 mM	starts to precipitate at 50 mM	>50 mM	>50 mM

Envio y Almacenamiento

Este producto se envia a temperatura ambiente. Almacenamiento de copolímero disuelto: a 2-8°C. . Almacenamiento de copolímero liofilizado a tiempo largo: a -20°C.

Resultado de Laboratorio

Durante mucho tiempo, la ciencia detrás de las proteínas de membrana se basó en detergentes tanto para la solubilización como para la estabilización. Sin embargo, los detergentes como DDM o LMNG vienen con una serie de problemas. Se puede evitar un proceso de selección que requiere mucho tiempo para encontrar el detergente correcto y la necesidad constante de agregarlo a todos los tampones. Pero esto se aplica a todos los nanodiscos sintéticos.

La Figura 1 muestra la cantidad de proteína de membrana de interés que se estabilizó con un DIBMALP en comparación con una construcción que usaba el detergente DDM. Como se puede ver claramente, DDM tiene muchas menos bandas específicas en los valores de kDA deseados de alrededor de 40-60 kDa.

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Una alternativa a los DIBMA tradicionales y su sensibilidad a la presencia de iones dentro de un tampón, son nuestros DIBMA modificados con glucosamina añadida o diol funcionalizado con amino. Como indica la figura 2, es necesaria una mayor tolerancia de Ca2+. Normalmente, DIBMA comienza a precipitar en tampones de retención de Ca2+ en concentraciones de alrededor de 25 mM. Usando DIBMA-Glicerol esta tolerancia aumenta a 50 mM. No hay precipitado visible en el fondo del tubo. En comparación, el DIBMA normal muestra un precipitado visible a 25 mM. En términos de tolerancia al Mg2+, tanto el DIBMA tradicional como el Glycerol-DIBMA muestran una alta tolerancia por encima de 50 mM.

Fig. 2 Precipitación de DIBMA en relación con la concentración de iones. Las concentraciones que se muestran comienzan en 5 mM y aumentan en pasos de 5 mM hasta 50 mM.

VIDEO

Mire nuestro video sobre cómo los nanodiscos pueden ayudarlo a superar uno de los desafíos más difíciles en las ciencias de las proteínas. Si le interesa más el manejo del producto, echa un vistazo a nuestro vídeo de protocolo. En él se puede seguir un completo proceso de solubilización mediante SMA.

Bibliografía

NpSRII	2021	Voskoboynikova, N.; Orekhov, P.; Bozdaganyan, M.; Kodde, F.; Rademacher, M.; Schowe, M.; Budke-Gieseking, A.; Brickwedde, B.; Psathaki, O.-E.; Mulkidjanian, A.Y.; Cosentino, K.; Shaitan, K.V.; Steinhoff, H.-J.11	DIBMA 10, Tris
NpSRII	2021	Voskoboynikova, N.; Margheretis E.G., Kodde F., Redemacher M., Schowe M., Budke-Gieseking A., Psathaki O-E-, Steinhoff H-J., Cosentino K., 12	DIBMA 10, Tris
–	2021	Brown C.J. , Trieber C., Overdiun M.13	DIBMA Glycerol DIBMA Glusosamine
Several different proteins	2021	Overduin M., Trieber C., Prosser R.S., Picard L-P., Sheff J.G.14	DIBMA Glycerol Synthetic Nanodisc Screening Kit

FAQ

– ¿Está el copolimero DIBMA de Cube Biotech listo para usar?

R: Sí, el producto DIBMA está listo para usar. Puede comenzar directamente con la solubilización. Lee nuestro protocolo para más información.

– ¿Qué pH es adecuado para DIBMA?

R: Desde un pH 7.5 en adelante. DIBMA no se solubiliza si el pH es inferior a 6.5.

– ¿Que concentraciones de DIBMA debo usar mi proteína?

R: En general, le recomendamos que agregue un 2.5 % de DIBMA a su solución. Pero las condiciones óptimas las tienes que examinar usted.

– Usé DIBMA para la solubilización de proteínas y apareció un precipitado blanco. ¿Qué pasó?

DIBMA probablemente se precipito. Debe verificar el pH y asegurarse de que nunca baje de 6.5.