La baja citotoxicidad de Transfectamine™ 7000 facilita una fácil optimización en varios rangos de concentración, lo que garantiza un impacto mínimo en la viabilidad celular.
Descripción
El reactivo de transfección de ARNi Transfectamine™ 7000 proporciona una solución confiable y eficaz para experimentos de silenciamiento de genes mediados por ARNi, que administra de manera eficiente ARN interferente pequeño (ARNi) y microARN (miARN) en diversos tipos de células.
Este reactivo permite a los investigadores lograr una alta eficiencia de transfección con concentraciones de ARNi más bajas, lo que da como resultado un silenciamiento de genes efectivo con efectos no específicos mínimos. La baja citotoxicidad de Transfectamine™ 7000 facilita una fácil optimización en varios rangos de concentración, lo que garantiza un impacto mínimo en la viabilidad celular. El protocolo de aplicación de Transfectamine™ 7000 es simplificado y rápido, lo que promueve resultados consistentes y reproducibles en experimentos de silenciamiento de genes.
Este reactivo es capaz de lograr niveles significativos de silenciamiento de genes en un amplio espectro de líneas celulares, lo que es crucial para obtener datos experimentales sólidos y concluyentes. Para aplicaciones de transfección de ARNi de alto rendimiento, Transfectamine™ 7000 ofrece un flujo de trabajo sencillo: el reactivo se mezcla con ARNi, se aplica a las células, se incuba y luego se evalúa el grado de inactivación del gen.
La eficiencia y la velocidad de este proceso, combinadas con la alta eficiencia de transfección, hacen de Transfectamine™ 7000 una opción óptima para el cribado de alto rendimiento y se puede adaptar fácilmente para sistemas automatizados o robóticos.
Nombre en ingles: Transfectamine™ 7000 siRNA Transfection Reagent
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| 60025 | Reactivo de Transfección Transfectamine™ 7000 siRNA | 1 ml |
| 60026 | Reactivo de Transfección Transfectamine™ 7000 siRNA | 5 ml |
| 60027 | Reactivo de Transfección Transfectamine™ 7000 siRNA | 50 ul |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento: Congelación a <-15°C. Minimizar exposición a la luz. Se entrega con geles.
Propiedades fisicas
| Solvente | Agua |
PREPARACIÓN CELULAR
Células de cultivo a ~ 80-90% de confluencia en el momento de la transfección.
Reemplazar con medio de crecimiento fresco antes de la transfección. Por ejemplo, reemplace con 2 ml de medio por pocillo para placas de 6 pocillos y 6 ml de medio para placas de 10 cm.
PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO
1. Mezcle de 50 a 200 nM de ARNi con 200 µL de medio sin suero.
2. Agregue 7,5 µL de Transfectamine™ 7000 al Paso 1.
3. Mezcle bien e incube a temperatura ambiente durante 20 minutos.
Nota: La proporción de Transfectamine™ 7000 y ARNi debe optimizarse para diferentes líneas celulares.
EJEMPLO DE PROTOCOLO EXPERIMENTAL
Tabla 1. Condiciones de transfección recomendadas para placas de 6 pocillos y 10 cm utilizando el reactivo de transfección Transfectamine™ 7000 siRNA.
| Componente | Placa de 6 pozos (por pozo) | Placa de 10cm |
| Fresh culture medium | 2 ml | 6 ml |
| siRNA | 50-200 nM | 50-200nM |
| Serum-free medium | 200 µL | 600µl |
| Transfectamine™ 7000 siRNA Transfection Reagent | ~7.5 µL | ~22.5 µL |
Imagen
Tabla 1. Las células HeLa se sometieron a inmunohistoquímica después de la transfección con ARNi de control o ARNi de GAPDH utilizando Lipofectamine 2000 y Transfectamine™ 7000. El experimento tuvo como objetivo comparar la eficacia de ambos métodos de transfección para inhibir la GAPDH. Después de 48 horas de transfección, se detectó GAPDH utilizando un anticuerpo de cabra anti-IgG de ratón iFluor® 488 (Cat No. 16528) mediante inmunohistoquímica.
Productos Relacionados
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Referencias
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