Tinte CytoTell™ Blue es un tinte fluorescente azul que tiñe las células de manera uniforme teniendo una citotoxicidad mínima.
Descripción
Tinte CytoTell™ Blue
La citometría de flujo combinada con tinción fluorescente es una herramienta poderosa para analizar poblaciones celulares heterogéneas. Entre todos los tintes fluorescentes existentes, el CFSE es el indicador de proliferación celular preferido y ampliamente utilizado para el análisis de células vivas.
Sin embargo, es imposible usar CFSE y sus análogos de fluoresceína para células transfectadas con GFP o para aplicaciones en las que se usa un anticuerpo marcado con FITC, ya que CFSE y sus análogos de fluoresceína tienen espectros de excitación y emisión casi idénticos a GFP o FITC.
Los tintes CytoTell™ se excitan bien en las principales líneas láser, como las de 405 nm, 488 nm o 633 nm con emisiones multicolores. Los tintes CytoTell™ tienen una citotoxicidad mínima y se utilizan para aplicaciones multicolores con líneas celulares GFP o anticuerpos marcados con FITC, ya que tienen espectros de excitación o emisión distintos de los de la fluoresceína. CytoTell™ Blue es un tinte fluorescente azul que tiñe las células de manera uniforme.
A medida que las células se dividen, el tinte se distribuye equitativamente entre las células hijas, lo que puede medirse como una reducción sucesiva a la mitad de la intensidad de fluorescencia del tinte. Las células marcadas con CytoTell™ Blue se pueden fijar y permeabilizar para el análisis de objetivos intracelulares utilizando fijadores estándar que contienen formaldehído y tampones de permeabilización a base de saponina. CytoTell™ Blue tiene una excitación máxima de 405 nm y puede excitarse mediante la línea láser violeta (405 nm).
Tiene una emisión máxima de 450 nm y se puede detectar con un filtro de paso de banda 450/20 (equivalente a Pacific Blue® o BD Horizon® V450), lo que lo hace compatible con aplicaciones que utilizan anticuerpos GFP o FITC para análisis de células multicolores.
Nombre en Ingles: CytoTell™ Blue
Catalogo | Producto | Presentación |
---|---|---|
AAT-22251 | CytoTell™ Blue, tinte AAT Bioquest | 500 pruebas |
AAT-22252 | CytoTell™ Blue, tinte AAT Bioquest | 2 x 500 pruebas |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Producto liofilizado. Almacenamiento a largo plazo: < -15 °C. Minimizar exposición a la luz. El producto se entrega con geles.
Plataforma
Citómetro de Flujo
Excitación | 405 nm laser |
Emisión | 450/40 nm filtro |
Especificaciones instrumento | Canal Pacific Blue Channel |
PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN STOCK
A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación.
Solución madre de tinte CytoTell™ (500X):
Agregue 500 l de DMSO al vial de tinte en polvo, mezcle bien con un vórtex para obtener una solución madre (500X). Nota: La solución madre debe usarse lo antes posible; cualquier solución restante debe dividirse en alícuotas y congelarse a < – 20 oC. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación y protéjalo de la luz.
PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN DE TRABAJO
Solución de trabajo de tinte CytoTellTM (1X):
Diluya la solución madre de DMSO 500X de 1 a 500 en Hanks y tampón Hepes 20 mM (HHBS) o el buffer de su elección, pH 7 (como 1 l de solución madre de DMSO 500X a tampón de 500 l) justo antes de su uso. Mézcle bien con un vórtex. Nota: La concentración final de la solución de trabajo del tinte debe determinarse empíricamente para diferentes tipos de células y/o condiciones experimentales. Se recomienda realizar pruebas en concentraciones que estén al menos por encima del rango de diez veces. Tal como CytoTell™ Red podría utilizar mucha menos cantidad en algunos tipos de células que las concentraciones recomendadas.
Espectro
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Propiedades Espectrales
Excitación (nm) | 410 |
Emisión (nm) | 445 |
Imagenes
Figura 1.
Ensayo de proliferación celular con CytoTell™Blue. Las células Jurkat se tiñen con CytoTell™ Blue el día 0 y se pasan en serie en una proporción de 1:1 durante 8 días. La intensidad de fluorescencia de cada generación se midió con el citómetro de flujo ACEA NovoCyte 3000 del canal Pacific Blue.
Formatos Relacionados
Productos Alternativos
Name | Excitation (nm) | Emission (nm) |
CytoTell™ Green | 510 | 525 |
CytoTell™ Orange | 541 | 560 |
Bibliografia
Ver todas las 15 bibliografias: Citation Explorer
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Referencias
Ver todas las 50 referencias: Citation Explorer
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Journal: J Vis Exp. (2010)
Application Notes
Multicolor Analysis of Cell Proliferation Using a New Panel of CytoTell™ Fluorescent Dyes
Relative Brightness of Fluorescent Dyes
A New Protein Crosslinking Method for Labeling and Modifying Antibodies
A Novel Fluorescent Probe for Imaging and Detecting Hydroxyl Radical in Living Cells
Abbreviation of Common Chemical Compounds Related to Peptides
FAQ
Are there any alternatives to BrdU (Bromodeoxyuridine)?
How do I stain T cells with CytoTell™ Blue?
What are common laser lines used in flow cytometry?
Can BrdU (Bromodeoxyuridine) be used in vitro?
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