Los productos y ensayos Screen Quest™ incluye una variedad de materiales de investigación biológica para múltiples aplicaciones con células. La serie incluye kits de ensayo relacionados con múltiples actividades celulares, células acopladas a receptores diseñadas en laboratorio, líneas celulares quiméricas e incluso tampones de ensayo optimizados. Esta amplia gama refleja un proceso de optimización interno que muestra una cuidadosa selección de componentes junto con extensas pruebas de calidad.

investigación biológica

Kits de ensayo de iones intracelulares

El equilibrio intracelular de iones fisiológicamente importantes y el transporte dentro y fuera de los orgánulos y de la propia célula (flujo de iones) es un enfoque de investigación destacado que se utiliza para cuantificar el comportamiento celular sano y aberrante. Los iones de calcio, potasio y cloruro se encuentran entre los más estudiados debido a sus funciones en la regulación de procesos celulares y fisiológicos, incluida la respiración, la frecuencia cardíaca y el dolor. Los defectos del canal de iones causan múltiples patologías (p. ej., fibrosis quística) y los errores en el equilibrio iónico pueden indicar problemas graves, como la formación de tumores.

Ensayos de calcio

El calcio es una figura central de la señalización y función celular. Utilizando etiquetas indicadoras que se unen preferentemente al calcio, los investigadores visualizan los cambios en la concentración de calcio y las acciones celulares facilitadas por este ion ubicuo. Para la detección de receptores acoplados a proteínas G (GPCR), los ensayos de flujo de calcio son la metodología más popular. Cada kit a continuación se combina con un indicador patentado diferente para diferentes requisitos de ensayo para brindar resultados eficientes y reproducibles

Buffer asociado: Buffer de ensayo de calcio Screen Quest™ 10X con Phenol Red Plus™

Se ha demostrado en múltiples casos que el buffer de ensayo de calcio Screen Quest™ 10X listo para usar con Phenol Red Plus™ aumenta la ventana de ensayo de calcio tanto en los kits Screen Quest™ como en el uso general.

Para herramientas de buffers, haga clic en el botón de la derecha para preparaciones adicionales. 

Tabla 4. Fura-2™ para kits de ensayo de iones intracelulares

Kit de Ensayo de Calcio Luminométrico

Para experimentos que requieren un ensayo de alta sensibilidad, nuestro kit basado en coelenterazina luminiscente es más adecuado que los kits de ensayo de calcio basados en fluorescencia. El kit de ensayo de calcio luminométrico Screen Quest™ utiliza un análogo de coelenterazina altamente sensible al calcio y permeable a la membrana como indicador de calcio para las células transfectadas con el gen de la apoaequorina. La aecuorina es una proteína bioluminiscente sensible al calcio de la medusa Aequorea victoria que se utiliza ampliamente como indicador de calcio en las células. El complejo de aecuorina emite luz azul cuando se une a los iones de calcio. La intensidad de la luminiscencia es directamente proporcional a la concentración de Ca2+.

ensayo de calcio
ATP Dosis-Respuesta en células CHO-aeq. Las células CHO transfectadas de forma estable con apoaecuorina se sembraron durante la noche a 50.000 células/100 µl/pocillo en una placa de 96 pocillos Costar de pared blanca/fondo transparente. Se eliminó el medio de crecimiento y las células se incubaron con 100 µl de solución de carga de colorante utilizando el kit de ensayo de calcio luminométrico Screen Quest™ durante 3 horas a temperatura ambiente y protegidas de la luz. NOVOstar (BMG Labtech) añadió ATP (25 µl/pocillo) para alcanzar las concentraciones finales indicadas. La CE50 de ATP es de aproximadamente 0,8 µM.
Tabl6. Kit de ensayo de calcio luminométrico para kits de ensayo de iones intracelulares
Cat#
Producto
Unidad
Ex
Em
36305Screen Quest™ Luminometric Calcium Assay Kit10 Placas437466
36306Screen Quest™ Luminometric Calcium Assay Kit100 Placas437466

Canales de Potasio y Cloruro

Tanto los canales de iones de potasio como los de cloruro facilitan las funciones celulares y fisiológicas, como la señalización celular y la propagación del impulso nervioso. La activación de canales iónicos y el comportamiento relacionado es un campo destacado de estudio biológico. Los kits de ensayo de AAT Bioquest abordan diversas necesidades experimentales y brindan resultados sensibles y eficientes adecuados para su uso con procesos de baja escala y automatización.

Tabla 7. Canales de potasio y cloruro para kits de ensayo de iones intracelulares

Kits de ensayo de potencial de membrana

Una célula sana tiene un potencial transmembrana estándar de -70 mV como resultado de los gradientes de concentración de una multitud de iones cargados como K+ y Cl-. Este potencial de membrana cumple múltiples funciones, incluida la contracción muscular, y las variaciones en la carga son una fuente útil de información sobre el comportamiento y la viabilidad celular. Mientras que los kits de ensayo de canales de iones específicos anteriores se utilizan para rastrear los movimientos de materiales particulares, estos kits de ensayo potenciales (en dos espectros de emisión fluorescente separados) visualizan los cambios generales en la carga.

Kits de Ensayo cAMP

El monofosfato de adenosina 3′,5′-cíclico (cAMP) es un destacado segundo mensajero en biología celular, que ayuda a transmitir las señales recibidas por los receptores de la membrana celular a las funciones intracelulares. Medir la actividad de cAMP es una métrica útil para evaluar la señalización celular y otras funciones.

ELISA

Empleando la eficacia del ensayo ELISA en formatos colorimétricos y fluorimétricos, estos kits completos no requieren acetilación y emplean sustratos Amplite™ patentados de AAT Bioquests para generar una señal proporcional a la actividad de AMPc.

Tabla 9. ELISA para Kits de Ensayos cAMP

FRET Sin lavado

Para experimentos que requieren una sensibilidad extrema, los formatos de resolución temporal son una opción popular para minimizar las señales de fondo. El kit de ensayo de AMPc sin lavado Screen Quest™ FRET emplea un anticuerpo anti-AMPc marcado y un trazador emparejado para diferenciar entre moléculas de AMPc libres y sin marcar, lo que proporciona una cuantificación precisa de la concentración de AMPc en comparación con un estándar de AMPc.

Tabla 10. FRET sin lavado para Kits de Ensayo cAMP

Paquete de servicio de ensayo cAMP de células vivas

El paquete de servicios de ensayo de AMPc de células vivas Screen Quest™ proporciona un control en tiempo real del cambio de AMPc intracelular en un formato de alto rendimiento y no requiere lisis celular. El ensayo funciona a través de las líneas celulares que contienen: un canal exógeno controlado por nucleótidos cíclicos (CNGC) o la proteína G G?16. El canal es activado por niveles elevados de AMPc intracelular, lo que da como resultado un flujo de iones y una despolarización de la membrana celular que se puede detectar con un indicador de calcio fluorescente (como Fluo-8® AM y Cal-520™ AM). La coexpresión de G \beta 16 con receptores específicos no acoplados a Gq dará como resultado la generación de una señal de calcio intracelular tras la estimulación del receptor. El paquete de servicio del ensayo de cAMP de células vivas Screen Quest™ incluye líneas celulares y reactivos.

celulas vivas

GPCR y líneas celulares quiméricas

AAT Bioquest ofrece un catálogo completo de células receptoras acopladas a proteína G y líneas de células quimeras adecuadas para ensayos de cAMP de células vivas y otras aplicaciones.

Kits de ensayo de Captación Biomolecular

Las fuentes biomoleculares de energía como la glucosa y los ácidos grasos son necesarias para impulsar toda la actividad y función celular. Las células suelen tener métodos dedicados de transporte activo de estas valiosas moléculas a través de las membranas y hacia el interior de la célula, donde pueden procesarse y utilizarse. La medición de la tasa y el alcance de la absorción biomolecular proporciona información útil sobre la viabilidad celular, así como información fisiológica para patologías como la diabetes.

Glucosa

Casi todos los organismos conocidos utilizan la glucosa como fuente de energía; rastrear su movimiento a través de las membranas celulares es crucial para evaluar la viabilidad y función celular. Los métodos tradicionales de seguimiento de la captación de glucosa incluyen sondas radiactivas, que tienen múltiples problemas de costo y seguridad. Utilizando un análogo de glucosa y sensores específicos asociados, los kits de análisis de captación de glucosa Screen Quest™ brindan un método de medición más seguro y eficiente en formato colorimétrico o fluorimétrico.

Acido graso

La obesidad y la diabetes son problemas de salud cada vez mayores a nivel mundial. Los ácidos grasos de múltiples tipos son un objetivo popular para tratamientos potenciales, particularmente en el metabolismo y el transporte celular. Incrustados en la membrana celular de la mayoría de los mamíferos, incluidos los humanos, los transportadores de ácidos grasos mueven activamente estas biomoléculas hacia el interior de la célula. Al emplear un formato de fluorescencia sensible y un sustrato patentado, el kit de ensayo de captación de ácidos grasos fluorimétricos Screen Quest™ permite una cuantificación precisa.

Kit de Ensayo MDR

La quimioterapia es el tratamiento dominante en oncología, pero su eficacia disminuye en los tumores que muestran resistencia a múltiples fármacos (MDR). La MDR es el resultado de múltiples factores, uno de los cuales es la sobreexpresión de complejos de transporte de proteínas seleccionados en las membranas celulares. Estos transportadores dependientes de ATP son el objetivo del kit de ensayo MDR fluorimétrico Screen Quest™, que muestra selectivamente una intensa señalización de fluorescencia en las células afectadas.

ensayo mdr
Efecto de la ciclosporina A sobre la inhibición de la bomba P-gp en células MCF-7/ADR. El aumento de la concentración de ciclosporina A resultó en un aumento de la señal de fluorescencia provocada por la inhibición de la bomba P-gp, que mejoró la acumulación intracelular del colorante indicador MDR. El EC50 = 2,4 ?M (medido con el kit) es similar al valor informado en la literatura.
Tabla 12. Kit de Ensayo MDR
Cat#
Producto
Unidad
Ex
Em
36340Screen Quest™ Fluorimetric MDR Assay Kit100 Pruebas492514
36341Screen Quest™ Fluorimetric MDR Assay Kit1000 Pruebas492514
Tabla 13. Ensayos de potencial de membrana de Screen Quest
Cat#
Producto
Unidad
Ex
Em
35999Screen Quest™ Membrane Potential Assay Kit *Orange Fluorescence*1 placa535560
36000Screen Quest™ Membrane Potential Assay Kit *Orange Fluorescence*10 placas535560
36001Screen Quest™ Membrane Potential Assay Kit *Orange Fluorescence*100 placas535560
36004Screen Quest™ Membrane Potential Assay Kit *Red Fluorescence*1 placa635660
36005Screen Quest™ Membrane Potential Assay Kit *Red Fluorescence*10 placas635660
36006Screen Quest™ Membrane Potential Assay Kit *Red Fluorescence*100 placas635660
36200Screen Quest™ Calbryte-590 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit1 Placa573588
36201Screen Quest™ Calbryte-590 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit10 Placas573588
36202Screen Quest™ Calbryte-590 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit100 Placas573588
36305Screen Quest™ Luminometric Calcium Assay Kit10 Placas437466
36306Screen Quest™ Luminometric Calcium Assay Kit100 Placas437466
36307Screen Quest™ Fluo-8 Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines*1 Placa490525
36308Screen Quest™ Fluo-8 Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines*10 Placas490525
36309Screen Quest™ Fluo-8 Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines*100 Placas490525
36314Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit1 Placa490525
36315Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit10 Placas490525
36316Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit100 Placas490525
36317Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit1 Placa490525
36318Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit10 Placas490525
36319Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit100 Placas490525
36320Screen Quest™ Fura-2 No Wash Calcium Assay Kit 10 Placas370476
36321Screen Quest™ Fura-2 No Wash Calcium Assay Kit 100 Placas370476
36325Screen Quest™ Fluo-4 No Wash Calcium Assay Kit10 Placas490525
36326Screen Quest™ Fluo-4 No Wash Calcium Assay Kit100 Placas490525
36330Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal*1 Placa530590
36331Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal*10 Placas530590
36332Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal*100 Placas530590
36333Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit1 Placa530590
36334Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit10 Placas530590
36335Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit100 Placas530590
36340Screen Quest™ Fluorimetric MDR Assay Kit100 Pruebas492514
36341Screen Quest™ Fluorimetric MDR Assay Kit1000 pruebas492514
36350Screen Quest™ Colorimetric Chloride Channel Assay Kit10 Placas630 
36351Screen Quest™ Colorimetric Chloride Channel Assay Kit100 Placas630 
36370Screen Quest™ Colorimetric ELISA cAMP Assay Kit1 placa650 
36371Screen Quest™ Colorimetric ELISA cAMP Assay Kit10 placas650 
36373Screen Quest™ Fluorimetric ELISA cAMP Assay Kit1 placa571585
36374Screen Quest™ Fluorimetric ELISA cAMP Assay Kit10 placas571585
36379Screen Quest™ FRET No Wash cAMP Assay Kit1 placa390650
36380Screen Quest™ FRET No Wash cAMP Assay Kit10 placas390650
36381Screen Quest™ FRET No Wash cAMP Assay Kit50 placas390650
36382Screen Quest™ Live Cell cAMP Assay Service PackPza490520
36385Screen Quest™ Fluorimetric Fatty Acid Uptake Assay Kit100 Pruebas490515
36500Screen Quest™ Fluorimetric Glucose Uptake Assay Kit100 Pruebas571585
36501Screen Quest™ Fluorimetric Glucose Uptake Assay Kit500 Pruebas571585
36503Screen Quest™ Colorimetric Glucose Uptake Assay Kit100 Pruebas575 
36504Screen Quest™ Colorimetric Glucose Uptake Assay Kit500 Pruebas575 
36550Screen Quest™ No Wash Potassium Channel Assay Kit1 Placa490525
36551Screen Quest™ No Wash Potassium Channel Assay Kit10 Placas490525
36552Screen Quest™ No Wash Potassium Channel Assay Kit100 Placas490525
38000Screen Quest™ Amylin 3 ReceptorPza
38001Screen Quest™ Cannabinoid Receptor Pza
38002Screen Quest™ Chemokine (C-C) Receptor 2BPza
38003Screen Quest™ Chemokine (C-X-C motif) Receptor 4Pza
38004Screen Quest™ Dopamine Receptor 1 (DRD1)Pza
38005Screen Quest™ Glucagon-like Receptor 1 (GLP1R)Pza
38006Screen Quest™ Opiate Receptor-like 1 (ORL1)Pza
38100Screen Quest™ Human Nociceptin Receptor Ga16 coupled CHO Cells (NOP-Ga16)Pza
38101Screen Quest™ CHO-Gqi Chimera Cell linePza
38102Screen Quest™ CHO-Gqo Chimera Cell linePza
38103Screen Quest™ CHO-Gqz Chimera Cell linePza
38104Screen Quest™ CHO-Gqs Chimera Cell linePza
38105Screen Quest™ CHO-Ga16 Chimera Cell linePza